公共场所浴盆脸脚盆微生物检测方法细菌总数测定.doc

公共场所浴盆脸脚盆微生物检测方法 细菌总数测定 GB /T 18204.11- 2000 1 范围 本标准规定了公共场所浴盆、脸(脚)盆中细菌总数的测定方法。 本标准适用于公共场所浴盆、脸(脚)盆细菌总数的测定。 2 引用标准 GB /T 18204.11- 2000公共场所浴盆、脸(脚)盆微生物检验方法细菌总数测定 3 定义 细菌总数：指公共场所浴盆、脸(脚)盆经过采样处理，在一定条件下培养后(培养基成分、培养温度、培养时间、pH值、需氧性质等)，25 c㎡表面上所含菌落的总数。本方法规定的培养条件下所得结果，只包括一群在营养琼脂上生长发育的嗜中温性需氧菌落总数。 细菌总数可作为判定公共场所浴盆、脸(脚)盆被污染程度的标志，也可以为公共场所浴盆、脸(脚)盆消毒效果的判定和评价提供依据。 4 仪器 见GB/T 18204.2-2000中第4章。 5 培养基和试剂 5.1 营养琼脂培养基 见 GB/T 18204.1 -2000中4.10 5.2 无菌生理盐水:分装125 mL/瓶供浴盆采样，50 mL/瓶供脸(脚)盆采样。 6 采样 6.1 采样必须在无菌操作下进行，采样用具应高压灭菌121℃20min 6.2 采样部位，选择在盆内侧壁二分之一至三分之一高度采样。 6.3 采样布点，浴盆可在四壁及盆底呈梅花布点，脸(脚)盆可在相对两侧壁布点。 6.4 采样方法 6.4.1 涂抹法:用浸有无菌生理盐水的棉拭子在规格板(5cmX5cm)内来回均匀涂满整个方格，并随之转动棉拭子，剪去手接触部位后，将涂抹浴盆的5个棉拭子一并放入125 mL生理盐水烧瓶中，涂抹脸(脚)盆的2个棉拭子一并放人50 mL生理盐水三角烧瓶中，充分振摇或在旋涡振荡器上振荡1 min,每毫升的菌浓度相当于1 cm,的菌量。 6.4.2 斑贴法:将5 cmX5 cm无菌滤纸片放人灭菌平皿中，注人灭菌生理盐水工mL/片(吸满为止)，以无菌操作将滤纸片贴到采样部位，1 min后按序取下，将贴浴盆的5片滤纸一并放人125 mL生理盐水瓶中，贴脸(脚)盆的2片滤纸一并放人50 mL生理盐水瓶中，充分振摇或在旋涡振荡器上振荡1 min，每毫升的菌浓度相当于1 cm,的菌量。 7 检验方法 7.1 用1 mL灭菌吸管吸取样品1 mL，加到灭菌平皿内，同样再吸I mL加到另一平皿内。 7.2 如污染严重，可做10倍递增稀释，每递增稀释一次，换一支无菌吸管，每个稀释度接种两个平皿。 7.3 稀释液移人平皿后，应及时将冷却至46℃的营养琼脂培养基(可放置46℃士1℃水浴保温)注人平皿约15 mL，并转动平皿使混合均匀。待琼脂凝固后，翻转平板，置36℃士1℃温箱内培养48 h, 8 菌落计数方法 见GB/T 18204. 2-2000中第8章。 浴盆、脸(脚)盆的细菌数按式(1)计算: m = 5k ·n …………(1) 式中:m— 细菌总数，cfu/25 c㎡ k— 稀 释 倍数; n一平均菌落数。