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抗氧化活性实验办法（体外实验）之公保含烟创作
1 、清除 DPPH 自由基能力的测定
称取一定量的 DPPH ，用无水乙醇配制成 0.04mg/mL
的 DPPH 溶 液 . 辨 别 取 2mL 分 歧 浓 度 （2 ， 4 ， 6 ，
8mg/mL ）的溶液，参加 2mL DPPH 溶液，混合平均，室
温放置 30min 后， 5000r/min 离心 10min. 取上清液于
517nm 处测吸光值 .用 Vc 作为阳性对照 .样品对 DPPH 自
由基的清除率用以下公式计算：
A A
DPPH 清除率 1 1 2 100%
A
0
A 0 — 2mL 无水乙醇 + 2mL DPPH 溶液的吸光值；
A 1— 2mL 样品溶液 + 2mL DPPH 溶液的吸光值；
A 2 — 2mL 样品溶液 + 2mL 无水乙醇的吸光值 .
2 、总复原能力的测定
在 10mL 离心管中辨别参加 0.2mol/L pH 6.6 的磷酸
缓冲液 2.5mL 和分歧浓度（ 2 ，4 ，6 ，8mg/mL ）的溶液
1mL ，参加 2.5 mL 1% 铁氰化钾，混合平均后于 50 ℃
FeCl 3 ，混匀后静置 10min ，在 700nm 处检测吸光值 .Vc
作为阳性对照 .
3 、对 Fe2+ 离子螯合能力的测定
辨别取 1mL 分歧浓度（ 2 ，4 ，6 ，8mg/mL ）的溶液
和 3.7mL 蒸馏水，参加 2mmol/L 的 FeCl 2 溶液 0.1mL 和
5mmol/L 的菲洛嗪溶液 0.2mL ， 25 ℃水浴 10min ，于
562nm 处测吸光值 .EDTA 为阳性对照 .样品对 Fe2+ 的螯合
率计算公式如下：
A A
Fe2+ 螯合率 1 1 2 100%
A
0
A 0 — 1mL 蒸馏水替代反响体系中样品溶液后的吸光
值；
A 1—样品溶液反响后的吸光值；
A 2 FeCl 2 溶液后的吸光值 .
4 、超氧自由基（ O 2 - ）清除率的测定
采用邻苯三酚自氧化法测定 .取 50mmol/L Tris-HCl 缓
冲液（ pH8.2 ）4.5mL ，置 25 ℃水浴中保温
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