大鼠皮层神经元细胞原代培养.pptVIP

皮层神经元细胞原代培养 1 ppt课件 ☞ 主要内容 : 2 ppt课件 精品资料 你怎么称呼老师？ 如果老师最后没有总结一节课的重点的难点，你是否会认为老师的教学方法需要改进？ 你所经历的课堂，是讲座式还是讨论式？ 教师的教鞭 “不怕太阳晒，也不怕那风雨狂，只怕先生骂我笨，没有学问无颜见爹娘 ……” “太阳当空照，花儿对我笑，小鸟说早早早……” 实验原理 ◆细胞培养是生物学和医学研究中最常用的手段之一。可分为原代培养和传代培养两种。 ◆原代培养：将动物机体的各种组织从机体中取 出，经各种酶（常用胰蛋白酶）、螯合剂（常用EDTA）或机械方法处理，分散成单细胞，置合适的培养基中培养，使细胞得以生存、生长和繁殖。 5 ppt课件 仪器、材料与试剂 材料与试剂 6 ppt课件 实验前准备工作 制备冰盒 0.1 %多聚赖氨酸包被 7 ppt课件 要点 细节决定成败 8 ppt课件 胰酶消化法 9 ppt课件 布局 酒精 PBS 冰盒 PBS PBS 器械 剥离血管及筋膜 取脑，分离皮层神经元 清洗血液 断头 剪碎组织块 10 ppt课件 11 ppt课件 12 ppt课件 13 ppt课件 14 ppt课件 15 ppt课件 16 ppt课件 材料选择 17 ppt课件 培养基选择 不建议血清培养 1 血清刺激胶质细胞和杂细胞分裂，影响神经元产量； 2 抑制胶质生长，往往要加入阿糖孢苷。严重的毒性会影响许多灵敏实验； 3血清培养的细胞状态很不均一，从正常到凋亡都有，严重影响试验准确， 而无血清专用培养基所有的正常细胞都处于一样的状态，要么都好，要么 都差，高度一致。 4 neurobasal和neurbasal-A被认为是最标准，最好的培养 基。需要的添加剂为 B27和谷氨酰胺。 18 ppt课件 培养板选择 19 ppt课件 重 点 剥膜 吹打时候难，造成神经元死亡 血管膜细胞会混入原代培养 中，培养成果根本不能用 20 ppt课件 重 点 消化习惯 消化过程中震荡 消化速度 胰酶 木瓜酶 DNA酶 21 ppt课件 22 ppt课件