病毒-工业微生物学课件.pptVIP

(2) RNA病毒 多数RNA病毒以ssRNA作为它们的遗传物质。 正链或阳性链：RNA碱基序列与病毒mRNA相同，指导蛋白质合成。如：脊髓灰质炎病毒，等 负链或阴性链：病毒RNA基因组与病毒mRNA互补。如：狂犬病毒，等。 片段基因组：许多RNA病毒基因组被分为独立的片断，每个片段编码一种蛋白。有的病毒基因组可以分为10到12个片段（如呼肠病毒），通常所有的片段都包含在同一个衣壳中。不过，也有些病毒将片段基因分布在不同的病毒粒子中（如：雀麦花叶病毒），但它们能够成功地侵染同一宿主。 许多植物及动物病毒的正链RNA基因组5’端具有7-甲基鸟嘌呤核苷帽子结构，3’末端具有poly-A尾巴。 一少部分病毒具有dsRNA基因组，都是片段式的。 2、病毒的蛋白质 衣壳蛋白：占病毒蛋白质成分的绝大部分。保护核酸；当病毒无包膜结构时，衣壳参与病毒对宿主的吸附、侵染；决定病毒对宿主的专一性和病毒的抗原性。 包膜蛋白：包膜的脂质和碳水化合物是正常的宿主组成成分，但蛋白是由病毒基因编码形成的，可伸出包膜形成刺突 。 存在于病毒中的酶类：病毒酶位于衣壳内，其中许多酶参与核酸的复制，例如，逆转录酶。也有些病毒的酶位于包膜或衣壳上（例如，流感唾液酸苷酶），协助病毒的侵染。 3、病毒的其它化学成分 包膜中含有丰富的磷脂和胆固醇、糖类 ，来源于宿主细胞 ； 少数无包膜的病毒也存在脂类； 一些病毒粒子中存在有机阳离子（如丁二胺、精胺）和无机阳离子。 第三节 噬菌体 一、噬菌体的分类 多数噬菌体可以按照其形态分为以下四类： 无尾二十面体型 收缩尾型（结构最复杂，例如E. coli的T偶数噬菌体） 非收缩尾型 丝状噬菌体 噬菌体分类的依据：宿主种类、免疫学关系等。 但目前最主要的分类依据还是噬菌体的形态和核酸特性。 噬菌体的遗传物质可以是DNA，也可以是RNA，已知的大部分噬菌体的遗传物质是dsDNA。 核酸 形态 二、噬菌体的复制周期 裂解性生活周期： DNA噬菌体在宿主细胞内复制后，宿主细胞裂解并释放新噬菌体。（的T偶数噬菌体 ） （一）双链DNA噬菌体的复制 1. 一步生长实验 1）将适量噬菌体接种于培养好的高浓度敏感细胞中，使每个敏感细胞至多只能吸附到一个噬菌体。 2）使已吸附的噬菌体建立同步感染 （稀释或抗体沉淀） 3）继续培养，定时取样，测定样品中病毒的滴度。 病毒的滴度（titer），又称效价，是指每毫升样品中含有的侵染性病毒粒子的数量。(双层平板法测) 以感染时间为横坐标，病毒滴度为纵坐标，绘制定量描述烈性噬菌体生长规律的实验曲线，称为一步生长曲线。 潜伏期：是从噬菌体吸附于宿主细胞表面到子代噬菌体释放所需的最短时间。包括：隐蔽（晦）期和胞内积累期。 裂解量：是每个受侵染的细胞所产生的子代噬菌体的数目。 两个重要参数 2. 噬菌体的复制过程（烈性噬菌体的裂解周期） （1）吸附和侵入 受体（吸附）位点：细胞壁上的脂多糖、蛋白质、磷壁酸，以及鞭毛和菌毛 附着 固着 尾部收缩 刺入细胞 DNA注入 T4噬菌体吸附和侵入宿主细胞过程： 如果大量噬菌体在短时间内吸附于同一细胞上，使细胞壁产生许多 小孔，也可引起细胞立即裂解，但并未进行噬菌体的增殖，这种现 象称为自外裂解（lysis from without）。 （2）噬菌体大分子的合成 早期mRNA ：宿主RNA聚合酶开始合成的病毒mRNA，即噬菌体DNA复制前转录的mRNA。 早期蛋白：早期mRNA翻译成的蛋白，这些蛋白将接管宿主细胞并合成病毒核酸。其中一些酶将宿主DNA降解成核苷酸，为病毒DNA的合成提供原料；一些蛋白对宿主细胞RNA聚合酶进行修饰，使其识别病毒的DNA启动子，开始转录合成中期mRNA。 中期mRNA：即病毒DNA复制所需的酶的mRNA。 噬菌体DNA注入宿主细胞后，宿主细胞自身的DNA、RNA和蛋白质的合成便会中止，转而合成病毒复制所需的成分。 中期蛋白：中期mRNA翻译成的蛋白(DNA复制所需的酶、羟甲基胞嘧啶合成酶以及晚期mRNA聚合酶等)，病毒DNA开始复制(某些碱基的修饰是抵制宿主的限制)。 多联体----合成的T4噬菌体DNA具有末端冗余(重复的一段碱基序列)，大约6-10个克隆通过末端冗余序列连接在一起，这种由若