第十章遗传工程.pptxVIP

第十章 遗传工程;第一节 遗传工程的概念;第二节 动物细胞工程;一、细胞融合 ;二、动物克隆技术 ;;?□核移植技术 动物克隆技术并不是象植物那样从体细胞直接发育成新的个体，而是要将供体复制对象的细胞核转入到去掉细胞核的卵细胞中才能实现。由于体细胞包含有全部的遗传信息，从体细胞获得完整的动物个体是完全可行的。动物体细胞是高度分化的细胞，克隆羊“多莉”的诞生说明动物体细胞也具有全能性，因此它是真正意义上的动物克隆。;动物克隆的基本过程 ;1．动物资源的种质保存包括地球上频危动物的挽救等。 2．生产移植器官，培育优良品种，与转基因技术相结合研制生物反应器生产基因药物。 3．克隆人。是全世界注目的焦点，有人设计了克隆人的技术路线 ;□??? 动物克隆的危险性： 1．克隆动物已出现广泛的免疫缺陷或早期夭亡。 2．克隆动物过程中也极有可能产生遗传性的变异（无性系变异），这在植物的克隆中已广泛得到研究和验证，会发生染色体变异，基因组DNA扩增和某些转位因子的激活。 3．克隆人不但面临社会、家庭伦理道德问题，也将面临健康安全问题。 ;第三节 基因工程;一、目的基因的获得;3、PCR法;PCR原理;PCR原理;二、工具酶、载体和宿主;工具酶;限制性内切酶II及其产生的3种不同末端;同切酶和同粘酶;Sma I 5′ ... C C C^G G G ... 3′ 3′ ... G G G^C C C ... 5′ ;连接酶及其对底物的要求: T4 Ligase, Ecoli Ligase;聚合酶(polymerase): DNA聚合酶I, klenow片段, Taq, Pfu, 末端转移酶 外切核酸酶(exonuclease): exo III, S1核酸酶, DNase I 脱磷酸酶(dephosphatase): 碱性磷酸酯酶CIP 磷酸化酶,激酶(kinase) 逆转录酶(reverse transcriptase) RNase H, RNase A 甲基化酶(methylase);载体及其构成基本要素;常用载体;宿主;常用宿主;lacZ;;;;三、转基因技术的应用; 利用基因工程技术不但能得到大量的具有特殊功能的基因。而且可以让这些特殊功能的基因生产出具有特殊功能的蛋白质药物，这是目前基因工程 领域中最活跃最有成果和极富商业价值的领域之一，究其原因： （1）蛋白质和多肽是基因表达的直接产物，可用重组DNA技术进行研究和生产。 （2）具有生物活性的蛋白和多??是珍稀而具有很高医疗价值的药物，用常规分离的方法很难制取。; 目前有几十种基因工程药物，常用的有：干扰素、白细胞介素、乙肝疫苗、人胰岛素和人生长激素等。 人类最早的商业化基因工程药物是人胰岛素和人生长激素，于80年代初投放市场，用大肠杆菌来生产，是基因工程 发展的里程碑。 ;;该方法用于合成人胰岛素 ;二、用真核细胞表达和生产基因工程药物 ;几种重要的基因工程药物已可用真核细胞反应器完成;四、转基因生物反应器