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精品文档 基因工程复习题 一、名词解释： （10～20%） 基因工程 基因工程工具酶 限制性内切酶 限制性内切酶的 Star 活性 PCR 引物 PCR 扩增平台期 DNA 芯片 基因组文库 cDNA 文库 转化 限制与修饰系统 原位杂交： 将细胞或组织的核酸固定保持在原来的位置上， 然后用探针与之杂交的一种核酸 分子杂交技术，该方法可较好地反映目的基因在细胞或组织中的分布和表达变化。 粘性末端：双链 DNA 被限制性内切酶切割后，形成的两条链错开几个碱基，而不是平齐的 末端。 Northern 印迹杂交：将 RNA 进行变性电泳后，再转移到固相支持物上与探针杂交的一种核 酸分子杂交技术，可用于检测目的基因的转录水平。 转位：一个或一组基因片段从基因组的一个位置转移到另一个位置的现象。 基因工程：在体外，用酶学方法将各种来源的 DNA 与载体 DNA 连接成为重组 DNA ，继而 通过转化和筛选得到含有目的基因的宿主细胞，最后进行扩增得到大量相同重组 DNA 分子 的过程称为基因工程，又称基因克隆、 DNA 克隆和重组 DNA 等。 目的基因：基因工程中，那些被感兴趣的、被选作研究对象的基因就叫作目的基因。 连接器： 人工合成的一段含有某些酶切位点寡核苷酸片段， 连接到目的基因的两端， 便于基 因重组中的切割和连接。 转化：受体细胞被导入外源 DNA 并使其生物性状发生改变的过程。 停滞效应： PCR 中后期，随着目的 DNA 扩展产物逐渐积累，酶的催化反应趋于饱和， DNA 扩增产物的增加减慢，进入相对稳定状态，即为停滞效应，又称平台期。 逆转录 PCR：以 mRNA 为原始模板进行的 PCR 反应。 PCR: 即聚合酶链式反应。在模板，引物， 4 种 dNTP 和耐热 DNA 聚合酶存在的条件下，特 异性地扩增位于两段已知序列之间的 DNA 区段地酶促合成反应。 α-互补（ α-complementation ）：指在 M13 噬菌体 DNA 或 PUC 质粒序列中，插入了 lac 启动 子-操纵子基因序列以及编码 β-半乳糖苷酶 N- 端 145 个氨基酸的核苷酸序列（又称 α-肽）， 该序列不能产生有活性的 β-半乳糖苷酶。 感染（ infection ）特指以 λ噬菌体、粘粒和真核细胞病毒为载体的重组 DNA 分子，在体外 经过包装成具有感染能力的病毒或噬菌体颗粒， 才能感染适当的细胞， 并在细胞内扩增。 其 中，由噬菌体和细胞病毒介导的遗传信息的转移过程又称为转导（ transduction ）。 47、转染（ transformation ）指真核细胞主动摄取或被动导入外源 DNA 片段而获得新的表型 的过程。 二、填空题（ 20%） 1、DNA 片段重组连接的方法主要有 平端连接、粘端连接、同聚尾连接、加接头连接 。 2、感受态细胞是指 具有摄取外源 DNA 分子能力的细胞 。 精品文档 精品文档 3、 λ噬菌体蛋白对重组 DNA 体外包装时，包装长度为野生型 λDNA 的 75~105% 。 5、PCR 反应体系含有 耐热的 TaqDNA 聚合酶，化学合成的寡核苷酸引物，四种 dNTP ，合 适的缓冲液体系 。 6、核酸探针包括： cDN