抗菌多肽药物的制备方法.pdf

目录 抗菌多肽药物的制备方法2 第一章 文献综述4 1.1 抗菌肽的分类4 1.2 抗菌肽的性质5 1.2.1 抗菌肽的一般理化性质5 1.2.2 抗菌肽的生物学特性5 1.3 抗菌肽的作用机理5 1.4 抗菌肽的制备方法6 1.4.1 生物材料提取法6 1.4.2 化学合成法6 1.4.3 基因工程法6 1.4.4 酶解法7 1.5 抗菌肽在各方面的应用前景及目前存在的问题 7 1.5.1 抗菌肽在医疗方面的应 7 1.5.2 抗菌肽在食品方面的应 8 1.5.3 抗菌肽在禽畜养殖业方面的应 8 1.5.5 抗菌肽研究存在的问题8 1.6 基因工程制备抗菌肽简介9 1.6.1 抗菌肽分子设计及改造策略9 1.6.2 目的基因的获取12 1.6.3 制备重组抗菌肽12 第二章 抗菌多肽的制备工艺 14 2.1 目前抗菌多肽的生产方法14 2.2 抗菌肽制备改造设计16 2.2.1 抗菌肽改造的原因16 2.2.2 抗菌肽改造的方法17 2.2.3 抗菌肽改造的依据17 图 2 抗菌肽的筛选18 2.3 抗菌肽的筛选19 2.3.1 通过生物信息学工具优化抗菌肽结构参数 19 2.3.2 抗菌肽的合成、纯化19 2.3.3 抗菌肽的活性检测20 2.3.4 抗菌肽的结构检测20 2.4 宿主菌的育种车间工艺流程及主要设备 22 2.4.1 主要设备以及用途：22 2.4.2 制备基因22 2.4.3 构建重组表达载体23 2.4.4 目的基因片段与载体的连接23 2.4.5 宿主菌的制备23 2.4.6 连接产物转入大肠杆菌24 2. 4.7 筛选24 2.5 抗菌肽的表达、纯化及分离的工艺流程及主要设备 24 2.5.1 主要设备及其用途：24 2.5.2 重组质粒在大肠杆菌中的表达24 2.5.3 融合蛋白的表达及制备25 2.5.4 抗菌肽的切割和纯化25 2.6 抗菌肽抗菌活性的检测25 第三章 抗菌肽药物的前景展望 26 抗菌多肽药物的制备方法 摘要 抗菌多肽是抗生素的一种。近年来，抗生素的滥用导致抗生素的耐药性是一个急需解决的 问题，而抗菌多肽药物具有抗菌谱广，作用强且迅速，不易产生耐药等优点；这些优点，使得 抗菌肽类药物有巨大的被开发价值，并具有成为最有可能取代其他抗生素的新型抗菌药物的潜 能。虽然抗菌肽的来源非常广泛，可以来源于动物，植物，微生物等；但是抗菌肽的工艺化生 产还有许多问题需要解决。在天然抗菌肽很少，人工合成抗菌肽成本太高的形势下，寻觅一个 能大量合成抗菌肽，并且成本相对比较低的抗菌肽的制备方法是本文的目的。本文通过查阅大 量的相关文献，综合实际情况，选择使用 DNA 合成仪合成抗菌肽基因，以大肠杆菌作为表达 系统并通过融合表达的方式来生产抗菌肽。根据大肠杆菌密码子偏爱性和稀有密码子改造抗菌 肽基因， 首先以数据库作为理论基础，以计算机软件作为理论辅助，理论上筛选出抗菌活性的 抗菌肽，再通过试验来进一步筛选