第十五章DNA重组技术的基本原理.pptxVIP

第十五章 DNA重组技术的基本原理;第一节 DNA重组的技术要件;DNA重组的 技术路线;一、重要的工具酶及其作用特点;（二）DNA连接酶;（三）DNA聚合酶;（四）逆转录酶;（五）RNA聚合酶;二、目的基因的载体类型及其功能;（一）质粒及其功能;;（二）噬菌体及其功能;（三）考斯质粒;（四）动物病毒的载体作用;　　;诱导植物产生瘤细胞;第二节 DNA重组的基本技术步骤;;一、目的基因的制备方法基因工程的主要目的是通过优良性状相关基因的重组，获得具有高度应用价值的新物种。　　为此，必须??现有生物群体中，根据需要分离用于克隆的此类基因，这样的基因通常称为目的基因。;（一）建立DNA文库;基因组文库建立顺序;基因文库和cDNA文库的建立;（三）人工合成DNA片段;（四）聚合酶链式反应（PCR）扩增DNA;PCR技术原理示意图;二、目的DNA和载体的体外连接;三、将重组的DNA复合物导入受体细胞;　（一）重组DNA分子转化　　 大肠杆菌是用得最广泛的基因克隆受体。 转化（transformation） ： 携带目的基因的外源DNA分子通过与膜结合进入受体细胞，并在其中稳定维持和表达的过程。以质粒为载体。 ;转化;（二）噬菌体重组体的转染 　　转染：通过噬菌体(病毒)颗粒感染，把DNA导入被感染的受体细胞的过程。 　　含目的基因的DNA与噬菌体（病毒）载体的重组DNA分