“基因工程与蛋白质工程”知识归纳及试题例析讲解学习.docxVIP

点 点 不 同 点 精品文档 “基因工程与蛋白质工程”知识归纳及试题例析 一、知识归纳 1．与 DNA分子相关的酶 名称 限制性核酸内切酶 DNA 连接酶 DNA 聚合酶 RNA 聚合酶 解旋酶 逆转录酶 作用 切割某种特定的脱氧核苷酸序列 连接两个 DNA 片段 在脱氧核苷酸链上添加单个脱氧酸 在核苷酸链上添加单个核糖核苷酸 使碱基间氢键断裂 以 RNA 为模板合成 DNA 参与的生理过程应用 基因工程 基因工程 DNA 复制 转录 DNA 复制及转录 逆转录及基因工程 特别注意： （ 1）限制性核酸内切酶的来源：多数来自原核生物；作用特点：主要切割外源 DNA， 对自身的 DNA不起作用从而达到保护自身的目的；作用结果：形成 DNA片断末端。 （2）各种酶都具有专一性，特别是限制酶只能识别特定的脱氧核苷酸序列，并在特定 的碱基之间切开。 2．基因工程的基本操作程序 （ 1）获取目的基因 ①基因文库： 是将含有某种生物不同基因的许多 DNA片段， 导入受体菌的群体中通过克 隆而储存，各个受体菌分别含有这种生物的不同基因。 ②基因组文库：基因文库中含有一种生物所有的基因就叫做基因组文库。 ③部分基因文库：含有一种生物的部分基因，就叫做部分基因文库，如 cDNA文库。 PCR技术与 DNA复制的比较 比较项目 相 原理 同 原料 PCR技术 DNA 复制 DNA 双链复制（（碱基互补配对） 四种游离的脱氧核苷酸 条件 解旋方式 场所 酶 结果 模板、 ATP、酶等 DNA 在高温下变性解旋 体外复制 热稳定的 DNA 聚合酶（ Taq 酶） 在短时间内形成大量的 DNA 片段 解旋酶催化 主要在细胞核内 细胞内含有的 DNA 聚合酶 形成整个 DNA 分子 （2）基因表达载体的构建（基因工程的核心） ①构建目的：使目的基因在受体细胞中稳定存在， 并且可以遗传给下一代， 同时， 使目 的基因能够表达和发挥作用。 ②一个基因表达载体的组成：目的基因、启动子、终止子、标记基因等。 ③构建方法 精品文档 联系 联系 精品文档 （ 3）将目的基因导入受体细胞—转化 生物种类 常用方法 受体细胞 转化过程 植物细胞 农杆菌转化法 体细胞 将目的基因插入 Ti 质粒的 TDNA 上→农杆菌→导入植 物细胞→整合到受体细胞的 DNA→表达 动物细胞 显微注射技术 受精卵 将含有目的基因的表达载体 提纯→取卵（受精卵） →显 微注射→受精卵发育→获得 具有新性状的动物 微生物细胞 Ca2+处理法 原核细胞 Ca2+处理细胞→感受态细胞 →重组表达载体与感受态细 胞混合→感受态细胞吸收 DNA 分子 特别注意： 受体细胞中常用植物受精卵或体细胞（经组织培养）、动物受精卵（一般不 用体细胞）、微生物──大肠杆菌、酵母菌等，但要合成糖蛋白、有生物活性的胰岛素则必 需用真核生物酵母菌──需内质网、 高尔基体的加工、分泌。 一般不用支原体，原因是它营 寄生生活； 一定不能用哺乳动物成熟红细胞， 原因是它无细胞核和众多的细胞器， 不能合成 蛋白质。 比较项目 原理 （4）目的基因的检测与鉴定 3．基因工程和蛋白质工程比较 基因工程 基因重组 过程 区 别 实质 结果 获取目的基因→构建表达载体→导入受体 细胞→ 目的基因的检测与鉴定 定向改造生物的遗传特性， 以获得人类所需 要的生物类型或生物产品（基因的异体表 达） 生产自然界中已经有的蛋白质 蛋白质工程 中心法则的逆转 预期蛋白质功能→设计蛋白质结构→推测 氨基酸序列→合成 DNA→表达出蛋白质 定向改造或生产人类所需要的蛋白质 生产自然界中没有的蛋白质 蛋白质工程是在基因工程的基础上延伸出来的第二代基因工程， 对现有蛋白质的改造或制 造新的蛋白质必须通过基因修饰或基因合成来实现 二、相关试题 1．下列关于基因工程的叙述，错误的是 （ ） A．目的基因和受体细胞均可来自动、植物或微生物 B．限制性核酸内切酶和 DNA连接酶是两类常用的工具酶 精品文档 动物胰岛素基因兔血红蛋白基因 动物胰岛素基因 兔血红蛋白基因 动物胰岛