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微生物检测方法 -1992 、FDA《 细菌分析手册―需氧菌平板计数 》，或 15,300 个(如 ISO 4833 : 1991 《 微生物学 大肠杆菌菌落计数通用指南最大可能数技术》)等。 菌落计数前先观测菌落生长的情况，一般同一稀释度的平板上的菌落数应相近，不同稀释度平板上的菌落数则应与稀释倍数成反比。蔓延菌落的生长会抑制其他菌株的生长，或者会覆盖其他的小菌落，所以最好不要选择有蔓延菌落生长的平板作为计数平板，但如必须选择，应在记录中标记清楚。如片状菌落不到平板的一半，而其余一半中菌落分布又很均匀，即可计算半个平板后乘 2 以代表全皿菌落数。平皿内如有链状菌落生长时(菌落之间无明显界限)，若只有一条链可视为一个菌落，如果有不同来源的几条链，则应将每条链作为一个菌落计。当每个稀释度制备了两块平板时，用所选择的平板的算术平均值来计算原始样品中的微生物的含量。样品的菌落数等于每克或每毫升的cfu值除以稀释度。 报告方式: 空白对照实验: 2.2大肠菌群 大肠菌群或称总大肠菌群是指一群能在37?条件下发酵乳糖产酸产气，需氧或兼性厌氧的革兰氏阴性无芽胞杆菌。符合这些条件的肠杆菌科细菌主要包括4个菌属: 埃希氏菌属，在此菌属中与人类生活密切相关的仅有一个种， 即大肠杆菌; 其次有柠檬酸杆菌属，其代表种有弗劳地枸橼酸杆菌; 克雷伯氏菌属，代表种为肺炎克雷伯氏菌; 肠杆菌属，代表种有阴沟杆菌和产气杆菌。 大肠菌群卫生学意义: 大肠菌群主要来源于人、畜粪便。大肠菌群是反映食品中是否存在粪便污染的指示菌，食品中有粪便污染，则可推测该食品中存在着肠道致病菌污染的可能性，潜伏着食物中毒和流行病的威胁，同时也反映出被测食品对人体健康存在危害。大肠菌群检测已被广泛应用于食品卫生工作中。 检验的标准通常使用GB/T 4789.3-2003、SN 0168-92 检验中需了解和注意事项: 1. 挑选菌落 在实际工作中，为了提高大肠菌群的检出率，应当熟悉大肠菌群的菌落色泽和形态。在GB/T 4789.3-2003检验方法中规定伊红美蓝平板为分离培养基，在该平板上，大肠菌群菌落呈黑紫色有光泽或无光泽，检出率为最高;红色、粉色菌落检出率较低。 2. 发酵管的产气量 在日常工作中，有时在发酵倒管内有极微小的气泡(有时比小米粒还小)，有时可遇到在初发酵时产酸未产气，但在液面及管壁却可以看到缓缓上浮的小气泡。这种情况大肠菌群的阳性检出率能达到30%-50%。所以不能忽视产气量少的，对未产气的乳糖发酵管如有疑问时，可以用手轻轻打动试管，如有气泡沿管壁上浮，即应考虑可能 有气体产生，而应作进一步试验。 3. 抑菌剂 大肠菌群检验中常用的抑菌剂有胆盐、十二烷基硫酸钠、煌绿、龙胆紫、孔雀绿等。抑菌剂可抑制样品中的—些杂菌，特别是G+的生长，而有利于大肠菌群的生长和挑选。 GB/T 4789.3-2003中乳糖胆盐发酵管利用胆盐作为抑菌剂，SN 0168-92中LST肉汤利用十二烷基硫酸钠(月桂基)作为抑菌剂，BGLB肉汤利用煌绿和胆盐作为抑菌剂。 2.3金黄色葡萄球菌 金黄色葡萄球菌在自然界中无处不在，空气、土壤、水、饲料、食品、灰尘及人和动物的排泄物中都可以存在。因此，食品受污染的机会很多，是引起食品污染和细菌性食物中毒的一种重要细菌。由金黄色葡萄球菌肠毒素引起的食物中毒已成为世界性的卫生问题。 一. 生物学特性: 1. G+、需氧或兼性厌氧，通常在肉浸液肉汤及肉浸液琼脂或加入血液的培养基上生长良好。 2. 耐盐性强。10%-15%的氯化钠培养基中能生长。 3. 在血琼脂上，几乎所有的葡萄球菌可产生α、β、γ和δ溶血素(一种或一种以上)。多数致病菌株可产生透明溶血环，菌落呈金黄色，有时也为白色，大而突起、圆形、不透明、表面光滑，周围有溶血圈。 4. 葡萄球菌是无芽胞菌中抵抗力最强者，耐干燥可达数月，加 热 80? 30min 才被杀死。 5,石炭酸， 0.1%升汞 10,15 min 死亡。 l : 100000,200000 龙胆紫溶液能抑制其生长。对磺胺增 效剂、青霉素、红霉素等较敏感，但耐药菌株逐年增多。 葡萄球菌肠毒素具有耐热性，加热 100? 30min 不被破坏. 要使其完全破坏需煮沸2h，这是葡萄球菌肠毒素的特点 二. 毒素和酶 金黄色葡萄球菌的致病力决定于细菌产生的毒素和酶的能力。致 病性菌株产生的毒素和酶主要有下列几种: 1(血浆凝固酶:此酶由金黄色葡萄球菌产生，能使含抗凝剂的 人或兔血浆发生凝固。血浆凝固酶试验是鉴定金黄色葡萄球菌的重要标志。 2(溶血毒素:多数致病性菌株均能产生，包括 α、β、γ和 δ溶血素，对人致病主要是α-溶血素。 3(杀白细胞素:能破坏人和家