蛋白质的分离提取方法.pptVIP

第一页，共29页。 一、凝胶色谱法（分配色谱法） 根据被分离物质的蛋白质相对分子质量的大小，利用具有网状结构的凝胶的分子筛作用，来进行分离。 大多数凝胶是由多糖类化合物（如葡聚糖或琼脂糖）构成的多孔小球体，内部有许多贯穿的通道。 ⑴.概念： 第二页，共29页。 ⑵.凝胶色谱法分离蛋白质的原理和具体过程 第三页，共29页。 ⑶.凝胶色谱法的原理—分子筛效应： 当相对分子量不同的蛋白质通过凝胶时，相对分子量较小的蛋白质容易进入凝胶内部的通道，路程较长，移动速度较慢；而相对分子量较大的蛋白质无法进入凝胶内部的通道，只能在凝胶外部移动，路程较短，移动速度较快。相对分子质量不同的蛋白质分子因此得以分离。 ▲依据的特性是：蛋白质分子量的大小。 第四页，共29页。 凝胶色谱法分离蛋白质过程的动画演示 第五页，共29页。 二、缓冲溶液 1.概念: 在一定的范围内，凡是能够抵制外加少量强酸或强碱的影响使原来溶液pH值基本保持不变的混合溶液。 2.缓冲溶液的组成举例： H2CO3 —— NaHCO3、CH3COOH —— CH3COONa NaH2PO4 —— Na2HPO4、KH2PO4 —— K2HPO4 3.缓冲溶液的配制 第六页，共29页。 在电场的作用下，这些带电分子会向着与其所带电荷相反的电极移动。 琼脂糖凝胶电泳示意图 ⑴.概念： 带电粒子在电场作用下发生迁移的过