蛋白质工程重点.pptVIP

1.3 亲和层析（Affinity chromatography） 原理 亲合层析是利用蛋白质与配体专一性识别并结合的特性而分离蛋白质的一种层析方法。 将与目标蛋白质专一性结合的配体固定于支持物上，当混合样品流过此支持物时，只有目标蛋白能与配体专一性结合，而其他杂蛋白不能结合。先用结合缓冲液洗脱杂蛋白，然后改变洗脱条件，将目标蛋白洗脱下来。 第九十五页，共153页。 蛋白质组（proteome） Proteome＝PROTEins + genOME，意思是Proteins expressed by a genome（基因组表达的所有蛋白质）。 一个基因组、一种生物或一种细胞/ 组织所表达的全套蛋白质 第九十六页，共153页。 二、电泳（ Electrophoresis ） 原理： 不同的物质由于其带电性质及其颗粒大小和形状不同，在一定的电场中它们的移动方向和移动速度不同，故此可使它们分离。 种类： SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS） （由于SDS是阴离子，使多肽表面覆盖的负电荷远远超过蛋白质分子原有的电荷量，消除了原来的电荷差异，使移动速度只和颗粒大小和形状相关。） 等电聚焦电泳（ Isoelectric focusing- IEF） 双向电泳（ Two Dimensional Electrophoresis ） 第九十七页，共153页。 包涵体及其性质