蛋白质工程第四讲分离纯化与分析.pptVIP

蛋白质工程第四讲分离纯化与分析 第一页，共29页。 一、分离纯化是分析的重要过程： 针对分析目的不同，对分析对象的要求和采取的措施不同。 若分析过程干扰很小，特异性很高，不需要对样品处理可直接测定。如：抗原及其抗体检测，配体及其配基等。 多数样品常常需要处理，才能满足检测的要求。如：蛋白质结构分析、动力学（变复性）分析、酶学性质研究等，纯度要求很高、避免干扰分析。 为了保证分析的准确度，避免检测体系中某些物质的干扰，往往对样品进行处理。 第二页，共29页。 二、分离分析的含义： 1、分离过程本身可以是分析过程 样品干扰严重，需通过分离再检查， 分离过程和分析过程耦合，分析性色谱技术（HPLC、TLC） 2、分离过程的分析——优化纯化工艺 分离过程管理：定性分析、定量分析、纯度、结构和功能分析等 3、基本要求： 客观、准确性，反映分析对象（目的物质）的真实性。 4、分析方法要求： 选择性（特异性）、精确度、灵敏度、重复性等 第一节 概述 第三页，共29页。 三、如何理解分离纯化与分析（三个层次） 物质的分析离不开分离： 分析要求样品的纯度：对样品进行分离纯化：如蛋白质、核酸等结构与功能关系的分析； 物质分离纯化过程离不开分析检测： 分离组分的收集、纯度、含量和组分分析；即分离过程管理。 分离纯化过程即是分析检测过程： 电泳、HPLC/Ms、G