高中生物第章基因工程第节基因工程的操作程序-目的基因的获得基因表达载体的构建同步备课教学案.docx

高中生物第章基因工程第节基因工程的操作程序 - 目的基因的获得基因表达载体的构建同步 备课教学案 专题课件 第 1 课时 目的基因的获得、基因表达载体的构建 [ 目标导读 ] 1. 阅读教材 P72～ 74 图文，掌握获取目的基因的两种方法。 2. 结合教材 P77 图 4－ 11，理解基因表达载体的构建过程。 [ 重难点击 ] 1. 目的基因的含义及常用获取方法。 2. 基因表达载体的构建。 3. 大肠杆菌质 粒的提取。 抑制疾病传播的转基因蚊子巴西等拉美国家深受致倦库蚊的危害。致倦库蚊可携带多种病 毒和寄生虫，能够传播脑炎、丝虫等传染病，而这些传染病常年在拉美国家肆虐。为了抑 制疾病的传播，巴西科学家培育出了一种转基因雄性致倦库蚊。科学家在雄性致倦库蚊体 内植入一种特殊基因，当具该基因的转基因雄蚊与野生雌蚊交配时，这种基因可以进入雌 蚊的基因组，并使雌蚊死亡，从而减少了该种蚊子的数量，达到抑制疾病传播的目的。怎 样才能最终得到转基因雄蚊呢？让我们一起来学习基因工程的基本操作程序吧！ 一、目的基因的获得 1．目的基因：是指人们所需要的进行研究的基因，如抗虫基因、抗病基因等。 2．获取目的基因的方法 (1) 化学合成法 ①概念：利用化学反应直接合成基因。 ②适用条件：已知核苷酸序列的、相对分子质量较小的目的基因。 ③仪器：自动合成仪。 ④缺点：成本昂贵，不适用于序列未知的目的基因。 (2) 从基因组中直接分离法——鸟枪法 ( 如图所示 ) 1 / 12 高中生物第章基因工程第节基因工程的操作程序 - 目的基因的获得基因表达载体的构建同步 备课教学案 (3) 扩增：在掌握了目的基因的部分或全部信息后，可以设计引物，利用扩增仪 增目的基因。 (4) 反转录法 ( 仪)直接扩 以为模板，借助反转录酶，通过仪合成与序列互补的片段，然后在聚合酶的作用下合成双 链，从而获得所需要的目的基因。 如图表示基因工程中获取水稻某目的基因的不同方法。据图分析： 1．图示分别是哪种方法？是在体内还是体外进行的？ 答案 三种方法分别是：反转录法、直接分离法和化学合成法，都是在体外进行的。 2．三种方法都需要酶，分别是哪些酶？ 答案 方法 a 需要反转录酶和聚合酶；方法 b 需要限制性内切酶；方法 c 需要聚合酶。 3．三种方法获取的目的基因的碱基对的排列顺序都相同吗？ 答案 不都相同。方法 b得到的是天然基因，方法 a得到的目的基因和天然基因相比不含内 含子，方法 c 得到的目的基因的碱基序列可能有多种。 2 / 12 高中生物第章基因工程第节基因工程的操作程序 - 目的基因的获得基因表达载体的构建同步 备课教学案 1．下列获得目的基因的方法中需要模板链的是 ( ) ①化学合成法 ②鸟枪法 ③反转录法 ④扩增目的基因 A．①② B ．②③ C ．③④ D ．①③ 答案 C 解析 化学合成法是利用自动合成仪合成已知核苷酸序列的较小的基因。鸟枪法是用很多 个限制性内切酶去切割获得目的基因，和化学合成法一样不需要模板。反转录法利用作为 模板反转录出一条单链，然后以这条单链的为模板合成出双链的，也是目的基因。技术也 需要模板。 2．下列属于技术的条件的是 ( ) ①单链的脱氧核糖核苷酸序列引物 ②目的基因所在的片段 ③脱氧核糖核苷酸 ④核糖 核苷酸 ⑤连接酶 A．①②③⑤ C．①②③⑤⑦ ⑥聚合酶 ⑦限制性内切酶 B．①②③⑥ D．①②④⑤⑦ 答案 B 解析 技术需要一对引物，即一对单链的脱氧核糖核苷酸序列引物，①正确；技术需要模 板，即目的基因所在的片段，②正确；需要脱氧核糖核苷酸作为原料，③正确；核糖核苷 酸是合成的原料，而合成的是，④错误；采用合成时，不需要连接酶，而需要聚合酶，⑤ 错误、⑥正确；体外合成时，不需要限制性内切酶，⑦错误。 知识拓展 技术的基本原理和过程 (1) 原理：双链复制。 (2) 前提：有一段已知目的基因的核苷酸序列。 (3) 过程 第一步：加热至 第二步：冷却至 第三步：加热至 94～98 ℃，解链为单链； 40～60 ℃，引物结合到互补链； 72 ℃左右，热稳定聚合酶