实验七褶皱臂尾轮虫.pptxVIP

褶皱臂尾轮虫;一、褶皱臂尾轮虫的分类及其特征; 褶皱臂尾轮虫属于轮虫纲、单巢目、游泳亚目、臂尾轮虫科、臂尾轮虫属。 褶皱臂尾轮虫为雌雄异体，雌体较为常见。一般分为头、躯干和尾三部分。内部器官比较复杂，已经具备了消化、排泄、生殖、肌肉、神经等器官系统。 ;轮虫具有以下三个重要特征 （1）身体前端或近前端有一个由纤毛组成的特殊区域头冠； （2）口腔或口管下面的咽喉部膨大成一发达的肌肉囊，囊内有由皮层衍生出的较复杂类似几丁质的咀嚼器； （3）体的两侧分列有一对由排泄管和焰茎球组成的原肾管。;二、褶皱臂尾轮虫的生活史;（1）单性生殖;（2）两性生殖;轮虫休眠卵能协助轮虫度过诸如食物不足、高温或低温、低溶解氧浓度和捕食等一系列不良环境，还能促进轮虫种群的扩撒，增加轮虫种群的基因多样性，对轮虫种群存活和繁衍具有重要意义。;褶皱臂尾轮虫的成虫和幼虫形态相似，只是大小有差异。成虫的被甲长196-250um，宽 150-202um；幼虫平均被甲长 96um，宽 72um。 当生长至被甲长达 140um 时，即开始产卵繁殖，此即生物学的最小型。;成体在 1 天内抱卵，卵孵化后约需 3-4 天时间即达生物学的最小型，产卵(抱卵)，并于第 4-5 天自卵孵化出新的世代，大致间隔 4h 可以产卵 1 次，随着日数的增加，产卵间隔随之延长，最终变为完全不产卵。 每尾雌体平均产卵 21 个。繁殖时间 6-7 天。 ;三、轮虫在生态毒理学研究中的应用;轮虫作为模式生物的生物学优势 ;另外，褶皱臂尾轮虫分布广泛、有关有机污染和重金属作用于轮虫的基础数据较多、对很多毒性物质敏感、培养技术成熟且容易掌握、在淡水、河口和海洋中均具有重要生态学地位。 轮虫由于以上优势，使其成为水生生态学、物种形成、进化生态学、性演化和种群动力学研究有用的模式生物。 ;2.轮虫的生态毒理学研究进展; 标准化的轮虫实验室实验包括急性和亚急性毒性实验。 半数致死浓度 LC50一般作为急性毒性实验首选的实验指标。 可能因为水中溶解的毒性物质浓度太低以至于不能引起试验生物在合理的时间内死亡，或是在最高浓度组的死亡率达不到 50%，不代表???种物质没有急性毒性效应，这时我们需要测定 LT50或是 EC50或研究其亚急性毒性效应。 ;3.急性毒性实验; 褶皱臂尾轮虫在毒性实验前均经过 48 小时预培养。预培养的条件为：褶皱臂尾轮虫以 100 ind/ml 的初始密度培养在装有灭菌海水的烧杯中，并投喂终浓度为 1*106ind/ml 的小球藻（Chlorella sp.）。烧杯放置于恒温光照培养箱，温度20±1°C，光照周期 12 h: 12 h，光照强度 1000~1200 lx。 实验中用于投喂褶皱臂尾轮虫的小球藻培养于三角烧瓶中，接种时加入 f/2培养基，每隔 12 小时摇动一次，培养温度、光照周期和强度与褶皱臂尾轮虫预培养条件一致。 ; 实验动物：龄期在0~2小时之内的褶皱臂尾轮虫。 实验容器：24孔板 实验器材：玻璃吸管、解剖镜 1.预实验：求出最高安全浓度和最低全致死浓度，在两者之间按级差设5-7个组，并设空白对照，设置一系列浓度的溶液用于急性毒性实验。;2.急性毒性实验 （1）挑选挂卵的母体，放入盛有小球藻（饵料）的小烧杯中，孵化3个小时左右。 （2）从盛有母体的小烧杯中选取龄期在0-2小时的幼虫用于实验，用玻璃吸管将幼虫移入24孔板中，每孔放入10个幼虫。 （3）向每一孔板中加入1ml的试剂，每组设为3个平行。 ; 4. 在光照培养箱中避光培养24h，24h后用解剖镜观察计数每个孔中轮虫的生存和死亡个数。按照经验，通过观察个体是否运动来判断是否死亡。如果对它是否死亡有疑问，可以再观察5s，若仍不运动且没有事物的流动就判定个体死亡。对照组死亡率必须控制在10%以下，否则结果视为无效。 5.求出LC50. ;思考题