慢病毒载体包装构建过程生物学自然科学专业资料-慢病毒载体包装.pdfVIP

资料收集于网络，如有侵权 请联系网站删除只供学习与交流 资料收集于网络，如有侵权 请联系网站删除只供学习与交流 慢病毒载体包装构建过程 慢病毒载体包装构建过程 shRNA 原理：慢病毒载体可以将外源基因或外源的 shRNA 有效地整合到宿主染色体上，从而达到 原理：慢病毒载体可以将外源基因或外源的 有效地整合到宿主染色体上，从而达到 持久性表达 目的序列的效果。在感染能力方面可有效地感染神经元细胞、肝细胞、心肌细胞、 持久性表达 目的序列的效果。在感染能力方面可有效地感染神经元细胞、肝细胞、心肌细胞、 肿瘤细胞、内皮细胞、干细胞等多种类型的细胞，从而达到良好的的基因治疗效果。对于一 肿瘤细胞、内皮细胞、干细胞等多种类型的细胞，从而达到良好的的基因治疗效果。对于一 些较难转染的细胞， 如原代细胞、干细胞、不分化的细胞等，使用慢病毒载体，能大大提 些较难转染的细胞， 如原代细胞、干细胞、不分化的细胞等，使用慢病毒载体，能大大提 shRNA shRNA 高目的基因或 目的 shRNA 的转导效率，且 目的基因或 目的 shRNA 整合到宿主细胞基因组的 高目的基因或 目的 的转导效率，且 目的基因或 目的 整合到宿主细胞基因组的 shRNA 几率大大增加，能够比较方便快捷地实现 目的基因或 目的 shRNA 的长期、稳定表达。 几率大大增加，能够比较方便快捷地实现 目的基因或 目的 的长期、稳定表达。 -1 (H IV-1)  -1 (H IV-1)  概念：慢病毒载体是指以人类免疫缺陷病毒 来源的一种病毒载体，慢病毒载体包 概念：慢病毒载体是指以人类免疫缺陷病毒 来源的一种病毒载体，慢病毒载体包 含了包装、转染、稳定整合所需要的遗传信息，是慢病毒载体系统的主要组成部分。携带有 含了包装、转染、稳定整合所需要的遗传信息，是慢病毒载体系统的主要组成部分。携带有 外源基因的慢病毒载体在慢病毒包装质粒、细胞系的辅助下，经过病毒包装成为有感染力的 外源基因的慢病毒载体在慢病毒包装质粒、细胞系的辅助下，经过病毒包装成为有感染力的 病毒颗粒，通过感染细胞或活体组织，实现外源基因在细胞或活体组织中表达。 病毒颗粒，通过感染细胞或活体组织，实现外源基因在细胞或活体组织中表达。 辅助成分：慢病毒载体辅助成分包括： 慢病毒包装质粒和可产生病毒颗粒的细胞系。 辅助成分：慢病毒载体辅助成分包括： 慢病毒包装质粒和可产生病毒颗粒的细胞系。 慢病毒载体包含了包装、转染、稳定整合所需要的遗传信息。慢病毒包装质粒可提供所有的 慢病毒载体包含了包装、转染、稳定整合所需要的遗传信息。慢病毒包装质粒可提供所有的 RNA  转录并包装 RNA 到重组的假病毒载体所需要的所有辅助蛋白。为产生高滴度的病毒颗粒， 转录并包装 到重组的假病毒载体所需要的所有辅助蛋白。为产生高滴度的病毒颗粒， 需要利用表达载体和包装质粒同时共转染细胞，在细胞中进行病毒的包装，包装好的假病毒 需要利用表达载体和包装质粒同时共转染细胞，在细胞中进行病毒的包装，包装好的假病毒 颗粒分泌到细胞外的培养基中，离心取得上清液后，可以直接用于宿主细胞的感染，目的基 颗粒分泌到细胞外的培养基中，离心取得上清液后，可以直接用于宿主细胞的感染，目的基 因进入到宿主细胞之后，经过反转录，整合到基因组，从而高水平的表达效应分子。 因进入到宿主细胞之后，经过反转录，整合到基因组，从而高水平的表达效应分子。 基本原理：慢病毒载体系统由两部分组成，即包装成分和载体成分。 基本原理：慢病毒载体系统由两部分组成，即包装成分和载体成分。 只供学习与交流 只供学习与交流 资料收集于网络，如有侵权 请联系网站删除只供学习与交流 资料收集于网络，如有侵权 请联系网站删除只供学习与交流 HIV-1 包装成分：由 HI