【新教材教案】（2019人教版选择性必修3）：1.2.1 微生物的培养技术及应用（教学设计）.docVIP

PAGE PAGE 5 1.2.1微生物的培养技术及应用 一、教学目标： 学习目标： 1.阐明在发酵工程中灭菌是获得纯净的微生物培养物的前提。 2.阐明无菌技术是在操作过程中，保持无菌物品与无菌区域不被微生物污染的技术。 3.概述平板划线法和稀释涂布平板法是实验室进行微生物分离和纯化的常用方法。 核心素养： 1.科学思维：根据微生物的代谢类型分析培养基的组成。 2.科学探究：讨论并掌握无菌技术的实验操作方法；讨论并掌握微生物的纯培养的方法。 二、教学过程： 【导入】 经过杀菌处理的牛奶中添加某些对人体有益的细菌，在经过发酵就可以制成酸奶，由于制作工艺并不复杂，一些人会在家里自制酸奶，自制酸奶虽然方便，但是食用自制酸奶导致肠胃不适的事件屡见不鲜，主要原因是制作过程中有杂菌混入。那么怎么才能保证无处不在的杂菌不混入发酵物中呢？ 这需要应用无菌技术和微生物的培养技术。 微生物的基本培养技术（一） 培养条件： 提供合适的营养和环境条件（培养基） 确保其它微生物无法混入（无菌技术） 培养基的配制 培养基 （1）概念：人们按照微生物对营养物质的不同需求，配置出供其生长繁殖的营养基质。 （2）作用：用以培养、分离、鉴定、保存微生物或积累其代谢物。 （3）类型 标准 培养基种类 培养基特点 作用 物理性质 固体培养基 加凝固剂，如琼脂 微生物的分离与鉴定，活菌计数，保藏菌种 半固体培养基 容器放倒不致流出，剧烈震动则破散 观察微生物的运动、分类鉴定 液体培养基 不加凝固剂 常用于工业生产 功能 选择培养基 根据某种微生物的特殊营养要求配置 选择分离 鉴别培养基 加入能与目的菌的代谢产物发生显色反应的指示剂 鉴定 来源 天然培养基 含化学成分不明确的天然物质 工业生产 合成培养基 用已知的化学物质配制 分类鉴定 培养基的配制： 表1-1??1000ml牛肉膏蛋白胨培养基的营养组成 组分 含量 提供的主要营养 牛肉膏 5g 碳源、磷酸盐和维生素等 蛋白胨 10g 氮源和维生素等 NaCl 5g 无机盐 H2O 定容至1000ml 水 （1）营养成分：水、无机盐、碳源、氮源，此外还要满足微生物生长对PH、特殊营养物质以及氧气的需求。 （2）还需满足微生物对 pH、特殊营养物质、氧气的需求 特殊营养物质：维生素、氨基酸、嘌呤、嘧啶等。 细菌（pH调至中性或微碱性）霉菌（pH调至酸性）厌氧生物（无氧条件）乳酸菌（要添加维生素） 二、无菌技术 1. 获得纯净的微生物培养物的关键是防止杂菌污染，主要包括消毒和灭菌。 2.消毒 指使用较为温和的物理、化学或生物等方法杀死物体表面或内部一部分微生物。 3.灭菌 指使用强烈的理化方法杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子。 4.比较 三、微生物的纯培养 1、纯培养 （1）概念：由单一个体繁殖所获得的微生物群体称为纯培养物，获得纯培养物的过程就是纯培养。 （2）步骤：1）配制培养基2）灭菌（培养基和器具）3）微生物接种4）分离5）恒温箱中培养 探究实践 （1）原理： 微生物群分散或稀释单个细胞，单个细胞繁殖单个菌落。 菌落：分散的微生物在适宜的固体培养基表面或内部可以繁殖形成肉眼可见的、有一定形态结构的子细胞群体，这就是菌落。 （2）方法：采用平板划线法和稀释涂布平板法将单个微生物分散在固体培养基上，之后得到的单菌落一般是由单个微生物形成的纯培养物。 （3）步骤 1、制备培养基 1）配制培养基 称取去皮马铃薯200g，切成小块，加水1000ml，加热煮沸至马铃薯软烂，用纱布过滤。向滤液中加入20g葡萄糖、15-20g琼脂，用蒸馏水定容至1000ml. 2）灭菌 将配制好的培养基转移到锥形瓶中，加棉塞，包上牛皮纸，并用皮筋勒紧，再放入高压蒸汽灭菌锅中，在压力为100kPa、温度为121℃的条件下，灭菌15-30min.将5-8套培养皿包成一包，用几层牛皮纸包紧，放入干热灭菌箱内，在160-170℃灭菌2h. 3）倒平板 待培养基冷却至50左右时，在酒精灯火焰附近倒平板。 倒平板注意事项： ①温度：50℃左右 ②操作：在酒精灯火焰附近 ③冷凝后平板倒置 2、接种和分离酵母菌 通过接种环在固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基表面。经过数次划线后培养可以分离得到单菌落。 3、培养酵母菌 完成平板划线后，待菌液被培养基吸收，将接种后的平板和一个未接种的平板倒置，放入28℃左右的恒温培养箱中培养24-28h. 请同学们小组为单位思考以下问题？ 探究一：培养基灭菌后，需要冷却到50℃左右时，才能用来倒平板。你用什么办法来估计培养基的温度？ 可以用手触摸盛有培养基的锥形瓶，感觉温度下降到刚刚不烫手即可。 探究二：平板冷凝后，为什么要将平板倒置？ 平板冷凝后，皿盖上会凝结水珠，凝固后的