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- 2021-10-19 发布于广东
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第
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课题 1 DNA 的粗提取与鉴定
一、实验原理
提取生物大分子的基本思路是 选用一定的物理或化学方法分离具有不同物理或化学性质的生物大分子 。对于 DNA 的粗提取而言, 就是要利用 DNA 与 RNA 、蛋白质和脂质 等在物理和化学性质方面的差异,提取 DNA ,去除其他成分。
DNA 的溶解性
DNA 和蛋白质等其他成分在不同浓度的 NaCl 溶液中溶解度不同,利用这一特点,选择适当的盐浓度就能使 DNA 充分溶解,而使杂质沉淀,或者相反,以达到分离目的。
此外, DNA 不溶于酒精溶液,但是细胞中的某些蛋白质则溶于
酒精。利用这一原理,可以将 DNA 与蛋白质进一步的分离。
DNA 对酶、高温和洗涤剂的耐受性
蛋白酶能水解 蛋白质,但是对 DNA 没有影响。大多数蛋白质不能忍受 60—80oC 的高温,而 DNA 在 80oC 以上才会变性。洗涤剂能够瓦解细胞膜,但对 DNA 没有影响。
DNA 的鉴定
在沸水浴条件下, DNA 遇二苯胺 会被染成蓝色,因此二苯胺可以作为鉴定 DNA 的试剂。
二、实验设计
1. 实验材料的选取
凡是含有 DNA 的生物材料都可以考虑,但是使用 DNA 含量相
对较高的生物组织,成功的可能性更大。
对较高的生物组织,成功的可能性更大。
2.
破碎细胞,获取含 DNA 的滤液
动物细胞的破碎比
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