第四节 经典液相色谱法.pptVIP

谢谢观赏 第四节 经典液相色谱法 液相色谱法：以液体为流动相的色谱法称～。 经典液相色谱：固定相颗粒较大且不均匀 常压下输送流动相 柱效较低 分析周期长 现代液相色谱：固定相颗粒小且均匀 高压下输送流动相 柱效较高 分析周期短 * 谢谢欣赏 2021-5-18 一、液-固吸附色谱 〔一〕别离原理 〔二〕常用吸附剂 〔三〕吸附剂和流动相的选择 * 谢谢欣赏 2021-5-18 〔一〕别离原理 各组分与流动相分子争夺吸附剂外表活性中心 利用吸附剂外表的活性吸附中心对不同组分的 吸附能力差异而实现别离 〔二〕常用吸附剂：多孔、微粒状物质 1. 硅胶 2. 氧化铝 3. 聚酰胺 * 谢谢欣赏 2021-5-18 1. 硅胶〔SiO2·H2O〕 结构：内部——硅氧交联结构→多孔结构 外表——有硅醇基→氢键作用→吸附活性中心 特性： 1〕与极性物质或不饱和化合物形成氢键 物质极性↑，吸附能力↑→强极性吸附中心，不易洗脱 吸附活性次序：活泼型束缚型游离型 2〕吸水→失活 →105～110OC烘干30分钟(可逆失水)→吸附力最大 →500OC烘干(不可逆失水)→活性丧失，无吸附力 适用：分析酸性或中性物质 * 谢谢欣赏 2021-5-18 续前 2. 氧化铝 碱性氧化铝 pH 9～10 适于分析碱性、中性物质 中性氧化铝 pH＞7.5 适于分析酸性碱性和中性物质 酸性氧化铝 pH 4～5 适于分析酸性、中性物质 3. 聚酰胺 氢键作用 氢键能力↑强，组分越后出柱 * 谢谢欣赏 2021-5-18 〔三〕吸附剂和流动相的选择： 依据被测组分、吸附剂和流动相的性质 1. 被测组分性质〔极性大小〕： 烃＜ - - - - - - - - ＜羧酸，醇 2. 吸附剂的活性： 吸附剂的活性↑大，对被测组分的吸附能力↑强 强极性物质——选择弱吸附剂 弱极性物质——选择强吸附剂 3. 流动相的极性： 流动相极性↑大，对被测组分的洗脱能力↑大 “相似相溶〞原那么 ：根据组分性质、吸附剂的活性， 选择适当极性的流动相 * 谢谢欣赏 2021-5-18 续前 4. 三者关系图示： 组分 吸附剂 流动相 极性 活性小 极性 非(弱)极性 活性大 非极性或弱极性 * 谢谢欣赏 2021-5-18 二、薄层色谱法 〔一〕概述 〔二〕定性参数 〔三〕吸附剂的选择 〔四〕展开剂的选择 〔五〕薄层板的制备 〔六〕定性与定量分析 * 谢谢欣赏 2021-5-18 〔一〕概述 1．定义：将固定相均匀涂布在外表光滑的平板上， 形成薄层而进行色谱别离和分析的方法 2．操作过程：见图示 铺板 →活化 →点样 → 展开 →定位(定性)/洗脱(定量) 3．别离机制：吸附〔分配，离子交换，空间排阻〕 4．特点：分析快速、灵敏、显色方便 5．应用：药物杂质检查、纯度测定 next * 谢谢欣赏 2021-5-18 图示 * 谢谢欣赏 2021-5-18 图示 L0 L1 L2 * 谢谢欣赏 2021-5-18 〔二〕定性参数 1. 比移值Rf * 谢谢欣赏 2021-5-18 续前 讨论 Rf与K有关，即与组分性质〔溶解度〕以及薄层板 和展开剂的性质有关 色谱条件一定，Rf只与组分性质有关，是薄层色谱根本定性参数，说明组分的色谱保存行为 * 谢谢欣赏 2021-5-18 谢谢观赏