第二章 色谱技术.pptVIP

谢谢观赏 第二章 色谱技术 * 谢谢欣赏 2021-5-18 2.1 色谱法的根本原理 色谱法：利用混合物中各组分在两相中分配系数不同，当流动相推动样品通过固定相时，在两相中进行连续反复、屡次分配，从而形成差速移动，到达别离。 2.1.1 色谱法分类： 1) 按固定相及流动相的状态分类：液相色谱、气相色谱 2) 按固定相形状性质分类：柱色谱、纸色谱、薄层色谱 * 谢谢欣赏 2021-5-18 * 谢谢欣赏 2021-5-18 3) 按色谱过程的机理分类： 吸附色谱：用固体吸附剂作固定相，利用组分在吸附剂上吸附力的不同，因而吸附平衡常数不同而将组分别离 分配色谱：用液体作固定相，利用组分在液相中的溶解度不同，因而分配系数不同进行别离 离子交换色谱：利用离子交换原理 排阻色谱：利用分子大小不同 电色谱：利用带电物质在电场作用下移动速度不同进行别离 * 谢谢欣赏 2021-5-18 4) 亦可按仪器分: aaa 气相色谱( Gaaas chromaaatograaaphy ) 填充柱气相色谱〔Paaacked column gaaas chromaaatograaaphy〕 毛细管气相色谱 (Caaapillaaary column gaaas chromaaatograaaphy) 裂解气相色谱(Pyrolysis gaaas chromaaatograaaphy ) 顶空气相色谱 ( Heaaadspaaace gaaas chromaaatograaaphy) 气相质谱联用技术〔Gaaas chromaaatograaaphy-Maaass spectrometry〕 bbb 液相色谱仪( Liquid chromaaatograaaphy ) 高效液相色谱( High performaaance liquid chromaaatograaaphy) 超临界流体色谱( Supercriticaaal fluid chromaaatograaaphy) 高效毛细管电泳(High performaaance caaapillaaary electrophoresis) 毛细管电色谱(Caaapillaaary electrochromaaatograaaphy) 液相质谱联用技术〔Liquid chromaaatograaaphy- Maaass spectrometry c 平面色谱法〔Plaaanaaar chromaaatograaaphy〕 薄层色谱 ( Thin laaayer chromaaatograaaphy) 薄层电泳色谱 (Thin laaayer electrophoresis ) 纸色谱( Paaaper chromaaatograaaphy) * 谢谢欣赏 2021-5-18 2.1.2 色谱图的重要参数 1.色谱峰 峰宽〔W或Y〕半峰宽〔W1/2,Y1/2), 峰高〔H〕 标准偏差(σ)Y＝4σ,亦称曲折点 峰宽，即峰高0.607处峰的宽度。 2.时间保存值 死时间t0， 保存时间tR， 校正保存时间tR’＝ tR - t0 3.体积保存值 死体积V0= t0Fc，Fc-流动相的流速 保存体积VR= tRFc， 校正保存体积VR’= tR’Fc * 谢谢欣赏 2021-5-18 4. 相对保存值〔别离因子，α〕α＝tR1’/tR2’ 5. 分配比〔K’)和相比〔β〕 分配比是指平衡时，组分在固定相和流动相中的重量比 6.分配系数(K) 在一定温度时, 到达分配平衡后, 组分在固定相中的浓度(Cs)与在流动相中的浓度(Cm)之比为分配系数. K= Cm Cs * 谢谢欣赏 2021-5-18 物理意义： 1. tR相同〔±2％以内〕或相对保存时间相同的是同一物质 2. σ，Y1/2,Y也是定性的主要参数 3. 峰面积和峰高是定量的主要参数 峰面积越大，峰高越高，含量越高 当tR较短，用峰高作定量的根据 当tR较长，用峰面积作定量根据 4.峰宽或半峰宽是衡量柱效的指标或参数。 5.谱带宽度越窄，说明柱效越高。 * 谢谢欣赏 2021-5-18 对于GC，用选择固定液的方法。对于LC，用选择流动相配比的方法。再加上程序升温〔GC〕或梯度淋洗〔LC〕等技术，将是提高别离度的有效方法。 * 谢谢欣赏 2021-5-18 2.1.3 塔板理论