ERH基因对黑色素瘤细胞增殖、转移及细胞周期的影响研究.docVIP

PAGE PAGE 41 ERH基因对黑色素瘤细胞增殖、转移及细胞周期的影响研究 前言 黑色素瘤是恶性程度极高的一类皮肤肿瘤，又称恶性黑色素瘤（恶黑，malignant melanoma，MM），是来源于神经嵴黑色素细胞的恶性肿瘤[1]，原发灶常位于皮肤，源于皮肤色素沉着部，由位于皮肤表皮层的黑色素合成细胞不受调控异常增殖形成[2]。近年来黑色瘤的发病率和死亡率呈持续增长的趋势[3，4]，严重威胁着人类的健康和生命。目前不单是白种人发病率增高，黄种人和黑种人黑色素瘤的发病率同样快速增高，并有家族聚集现象。2015 年针对中国的大规模癌症统计数据分析指出，黑色素瘤在中国人群的发病率达 8%，死亡率为 3.2%[5]。早期或局限性黑色素瘤，手术切除可达到满意的效果，但早期发现难；中晚期恶性黑色素瘤的患者即便积极采取手术、放疗、化疗和基因靶向治疗等综合治疗模式，疗效及预后也极差，5年生存率仅约15%[6]。虽然目前从基因突变、免疫逃逸、肿瘤微环境等多个角度对黑色素瘤发生发展的机制进行了深入探讨，但尚未出现干预其发病率和死亡率的理想措施[7]。 黑色素瘤的发病机制目前尚未完全阐明，大体认为，环境因素和遗传因素的作用是恶性黑色素瘤发病的两大重要因素。环境因素主要是由于阳光下暴露时间过长造成紫外线照射增加等[8]；遗传因素包括遗传学的异常改变（如基因突变、扩增、易位继而导致的癌基因激活）和表观遗传学的改变（如甲基化介导的抑瘤基因失活）。 癌基因的激活和抑瘤基因失活最终导致黑素细胞获得无限生长及增殖的能力。研究发现了多条信号通路途径能够参与黑色素瘤的增殖、凋亡和周期调控等。其中：经典的MAPK-ERK途径[9-13]（包括BRAF，HRAS,NRAS，KRAS, MEK1/2，ERK1/2等蛋白），这一途径是调控肿瘤细胞的一种重要信号通路途径，参与了黑色素瘤的增殖、转移、凋亡等重要过程，在黑色素瘤的发生发展中起着重要作用；而该通路中以BRAF的研究最为广泛，临床应用证明，针对BRAFV600E 突变的的黑色素瘤患者，单独应用高选择性的BRAFV600E靶向抑制药物（威罗菲尼或达拉菲尼）或将BRAFV600E抑制药物与MEK抑制剂（曲美替尼或Cobimetinib）联合应用，能显著抑制黑色素瘤细胞的增殖并促进其凋亡，具有良好的临床疗效[14-17]。第二是PI3K-AKT-PTEN途径,作为抑癌基因，PTEN能抑制PI3K-AKT通路，在细胞的增殖、凋亡及转移过程具有重要的生物学功能，PTEN基因的失活将导致黑色素细胞的恶化致瘤甚至癌变[18-22]。第三是p16-cyclin D1-CDK4途径，在部分黑色素瘤家族聚集的族群中，可大量发现其CDKN2A基因的缺失[19,23]，CDKN2A基因能编码两种肿瘤抑制基因p16INK4A和 p14ARF，前者通过抑制cyclin D1-CDK4复合体活性从而抑制pRB的磷酸化，进而调节G1-S期进程，阻滞细胞周期，抑制肿瘤细胞的增殖， CDKN2A基因的缺失后，可导致黑色素瘤细胞的增殖失控[24,25]。也有研究表明在部分黑色素瘤（如脉络膜黑色素瘤）中存在着MITF途径[26,27]，MITF作为原癌基因，可以调节参与周期调控的CDK2、p16、p21等分子及参与凋亡的BCL-2分子，与黑色素瘤关系密切。虽然在黑色素瘤的发生发展过程中，上述途径扮演着重要的作用，具有重大的临床研究价值，但它们在目前黑色素瘤的研究及治疗仍具有很大的局限性：①上述途径中大部分分子的作用过于广泛，部分信号分子同时参与不同信号途径，具有广泛的生物学功能，且信号分子本身作用在受到抑制或激活状态下，可借由旁路代偿恢复其生物学功能，故在针对黑色素瘤进行治疗靶点的选择上，上述信号分子不具有特异性的靶向功能；②同时目前临床上已应用的强效抗黑色素瘤的靶向分子药物，已逐渐出现疗效下降的耐药现象，黑色素瘤的治疗需要更有效和更有特异选择性的新一代靶向药物。以上原因均促使我们进行新的黑色素瘤分子治疗靶点研究。 ERH (enhancer of the rudimentary gene homologue，人类发育缺陷基因增强因子)是高度保守的小分子核蛋白，以二聚体形式发挥生物学功能，ERH单体由4股反向平行的β链与3个双性α螺旋组成[28]。目前研究发现ERH参与嘧啶代谢[29]及胚胎发育[30,31]，并可以与DCOH/PCD、FCP1、SPT5、PDIP46/SKAR、CIZ1等[32-35]及SNRPD3蛋白[28]结合，具有嘧啶合成、转录抑制、细胞周期调控、mRNA剪接功能、以及调控DNA复制等功能，且大量研究发现ERH在肿瘤组织中表达上调[29,36]。但这些发现仅对ERH的生物学功能及部分机制做了简单研究，未行进一步体内实