动物细胞的原代培养.pptVIP

脾脏(pízàng)免疫－2 注射(zhùshè)麻药 第三十页，共39页。 脾脏(pízàng)免疫－3 打结(dǎ jié)固定小鼠 第三十一页，共39页。 脾脏(pízàng)免疫－4 酒精(jiǔjīng)消毒 去毛 碘酒(diǎn jiǔ)消毒 第三十二页，共39页。 脾脏(pízàng)免疫－5 剪开外皮 剪开腹膜(fùmó) 找到脾脏(pízàng) 第三十三页，共39页。 脾脏(pízàng)免疫－6 注射(zhùshè)抗原 第三十四页，共39页。 脾脏(pízàng)免疫－7 注射(zhùshè)双抗 缝合(fénghé)伤口 第三十五页，共39页。 每隔15天重复(chóngfù)注射作加强免疫，共重复(chóngfù)2次 第三十六页，共39页。 第三次免疫之后10天，将小鼠断尾取血，用ELISA方法，检测(jiǎn cè)血清效价。 第三十七页，共39页。 取脾细胞融合前3天加强免疫一次，以活化(huóhuà)B淋巴细胞 第三十八页，共39页。 动物细胞的原代培养(péiyǎng) －－组织(zǔzhī)块法 第一页，共39页。 无菌室 下风口(fēngkǒu) 上风口(fēngkǒu) 第二页，共39页。 液氮罐 安全柜 第三页，共39页。 着装(zhe zhuānɡ) 第四页，共39页。 操作者进入无菌室前先用肥皂洗净双手，然后(ránhòu)用1‰ 新洁尔灭浸泡消毒5分钟 第五页，共39页。 将小白鼠断颈处死，然后用75%酒精或1‰ 新洁尔灭浸泡(jìnpào)消毒，迅速进入无菌室。 第六页，共39页。 将小白鼠置超净工作台上，打开(dǎ kāi)腹腔 第七页，共39页。 用眼科(yǎn kē)剪和镊，将肾外膜剪破，并将其剥向肾门，去肾外膜及脂肪， 第八页，共39页。 剪碎组织(zǔzhī) 第九页，共39页。 接种(jiēzhòng)组织块 第十页，共39页。 移入培养箱中（注意贴有组织(zǔzhī)块的一面朝上）， 静止2～3小时(xiǎoshí)，然后将细胞培养瓶轻轻翻转，继续静止培养。 第十一页，共39页。 观察(guānchá) 24～48小时后若培养液变成黄色且混浊，表示已被污染； 若培养液变成紫色，一般细胞生长不好，则培养液pH过高； 若培养液显为橙黄、橘红且清澈(qīngchè)，一般显示细胞生长良好。在相差显微镜下观察，若此时见细胞自组织边缘长出。 继续培养3～5日，再换部分或全部培养液，待多数组织块的生长晕相接，小心挑掉组织块，继续培养3～4天，细胞贴满细胞培养瓶壁时便可进行传代培养。 第十二页，共39页。 骨髓瘤细胞(xìbāo)的培养 第十三页，共39页。 骨髓瘤细胞(xìbāo) 第十四页，共39页。 消化(xiāohuà)数分钟 第十五页，共39页。 中止(zhōngzhǐ)消化、吹散细胞 第十六页，共39页。 收集(shōují)细胞、离心 第十七页，共39页。 计数(jì shù) 第十八页，共39页。 细胞(xìbāo)传代 37℃、5％CO2培养(péiyǎng) 第十九页，共39页。 第二十页，共39页。 小鼠的免疫(miǎnyì)实验 第二十一页，共39页。 市售绵羊(miányáng)血 第二十二页，共39页。 血球计数板计数，调整(tiáozhěng)细胞浓度 第二十三页，共39页。 抓小鼠的方法(fāngfǎ) 第二十四页，共39页。 腹腔注射(zhùshè)免疫 第二十五页，共39页。 尾静脉(jìngmài)免疫 第二十六页，共39页。 皮下免疫(miǎnyì) 第二十七页，共39页。 足垫免疫(miǎnyì) 第二十八页，共39页。 脾脏(pízàng)免疫－1 所需器具(qìjù) 称重(chēnɡ zhònɡ) 第二十九页，共39页。 词语：消毒 拼音：xiāo dú 解释：消除毒害。宋赵令畤《侯鲭录》卷一：“董仲舒曰：‘太平之世则风不鸣条，开甲散萌而已……雪不封陵，弭害消毒而已。’”用物理方法或化学药品杀灭致病的微生物。丁玲《在医院中》四：“她陡的被一种气氛压着，无言的去穿好消毒的衣帽。”巴金《爝火集·怀念萧珊》：“那天是星斯天，卫生防疫站因为我们家发现了肝炎病人，派人上午来做消毒工作。” 词语：眼科 拼音：yǎn kē 解释：医疗分科中专治眼病的一科。明陶宗仪《辍耕录·医科》：“医有十三科，考之《圣济总録》，大方脉杂医科、小方脉科、风科、产科兼妇人杂病科、眼科、口齿兼咽喉科，正骨兼金鏃科、疮肿科、鍼灸科，祝由科则通兼言。” 词语：注意 拼音：zhù yì 解释：留意。谓把