细胞融合专业知识讲座.pptVIP

细胞融合专业知识讲座;一、试验目;二、试验内容; 聚乙二醇（polyethyleneglycol,PEG）法原理: PEG分子能改变各类细胞膜结构, 使两细胞接触点处质膜脂类分子发生疏散和重组, 因为两细胞接口处双分子层质膜相互亲合以及相互表面张力作用, 使细胞发生融合。; ㈡试验方法 1. 处死蟾蜍。 2. 取血: 注射器内吸收1ml Alsver液, 再吸收1ml蛙血, 加入已盛有8ml Alsver液玻璃离心管。 3. 分别取1ml细胞悬液移入塑料离心管中, 加入0.85%生理盐水4ml混匀, 1200r/min, 离心5min。 4. 弃去上清液, 再加入0.85%生理盐水至5ml, 混匀, 离心。 5. 反复步骤4。 ; 6．搜集最终一次离心沉淀血细胞, 加入1mlGKN液混匀。（按压积红细胞体积配成10%红细胞悬液） 7．再加入0.5ml预热50%PEG混匀, 室温下分别于2min、15min取一滴该悬液于洁净载玻片上, 盖上盖玻片显微镜下观察。 ;细胞融合;三、作业