第十章基因工程技术育种.pptxVIP

第九章 基因工程技术育种;★1、概念：是指将一种或多种生物体（供体）的基因与载体在体外进行拼接重组，然后转入另一种生物体（受体）内，使之按照人们的意愿遗传并表达出新的性状。;★2、诞生： 　1971年，美国Smith,H.O.　等分离出一种限制性酶，可酶切病毒的DNA分子； 　1972年：Ｂerg, P.　等实现不同酶切DNA片段的体外连接； 　1973年：Cohen,s.等将体外重组的DNA 转入大肠杆菌细胞并得以表达。 　;★３、基本过程：;;目的基因的分离与鉴定 ;★限制性内切核酸酶 (restriction enzymes)： 在细菌中此酶的功能是降解外来DNA分子，以限制(restriction )或阻止病毒侵染。 第Ⅱ类限制性酶： 　　能识别一段特异的DNA序列，准确地酶切双链DNA的特异序列—回纹对称序列。;　载体 ;★作为载体DNA分子，需具备四个条件： ⑴具复制原点(ori)，能携带的外源DNA片段独立地自我复制； ⑵具有多克隆位点，即具有多种限制性酶的切点，用于克隆外源DNA片段； ⑶至少具有一个选择标记基因； ⑷易从宿主细胞中回收。 ;1. 细菌质粒 ;2. λ噬菌体 ;3. 穿梭载体 ;DNA连接酶能催化双链DNA切口处的5′-磷酸根和3′-羟基生成磷酸二酯键。这种反应需要供给能量，大