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冷冻电镜技术 冷冻电镜技术 冷冻电镜技术 实用标准文案 冷冻电镜技术 课程学习报告 一、课程所讲基础知识回顾 1、电子显微镜成像技术的发展历史 （ 1）上世纪 50 年代的负染技术（分辨率2mm ）： 该技术的原理为重金属燃料与H 结合，特点为对电子散射强，视野暗，衬 度大，易观察到生物材料。但不足之处在于染料颗粒较大，不易进入分子内部。 此外，因样品需要脱水处理，会造成结构失真。 （ 2）上世纪 60 年代的三维重构技术 三维重构的数学原理为傅里叶变换，其关键性质为： 三维函数投影的傅里叶 变换等于该三维函数傅里叶变换在垂直于投影方向上的中央截面。因此，通过对 待测立体物质的多角度投影信息采集，可以借助数学的桥梁， 重构出该物质的三 维结构。显然，对待测物质投影采集的角度越多，越精确，重构出的三维图像越 接近真实。 在 60 年代， T4 噬菌体的结构通过该方法被成功解析。 3）上世纪 70 年代的电子晶体学 即根据电子衍射的花样确定物质的晶体结构。 被观测的物体通过物镜形成衍 射图样，而这些衍射光束的低散射角部分再通过透镜而形成显微像。该方法相当 于对原物体进行两次傅里叶变换， 一为将物体转换成衍射谱， 二为逆傅里叶变换 使衍射谱重构成显微图像。 在 70 年代，电子晶体学的发展使得第 1 个膜蛋白结构被成功解析。 4）上世纪 80 年代的快速冷冻技术（分辨率达到 0