新型冠状病毒RBD的重组病毒样颗粒及其构建方法发明专利.pdfVIP

(19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利申请 (10)申请公布号 CN 112661819 A (43)申请公布日 2021.04.16 (21)申请号 202110031257.3 (51)Int.Cl. C07K 14/165 (2006.01) (22)申请日 2021.01.11 C12N 15/62 (2006.01) (71)申请人 军事科学院军事医学研究院军事兽 C12N 15/866 (2006.01) 医研究所 A61K 39/215 (2006.01) 地址 130000 吉林省长春市净月开发区柳 A61P 31/14 (2006.01) 莺西路666号研究所 (72)发明人 金宁一　李昌　郝鹏飞　许汪　 李乐天　陈竞　鲁会军　李霄　 田明尧　高子函　时小双　郝嘉翼　 张爽　伊立超　宋利娜　姜宇航　 徐鹏　任世斌　 (74)专利代理机构 北京一枝笔知识产权代理事 务所(普通合伙) 11791 代理人 张庆瑞 权利要求书1页 说明书4页 附图3页 (54)发明名称 新型冠状病毒RBD的重组病毒样颗粒及其构 建方法 (57)摘要 本发明涉及生物医学领域，特别涉及新型冠 状病毒RBD的重组病毒样颗粒及其构建方法。本 发明将SARS‑CoV‑2RBD序列插入至乙肝核心抗原 序列，连接至pFastBacDual载体，转化到DH10Bac 感受态细胞后获得重组杆粒。将重组杆粒转染至 sf9细胞后进行病毒拯救，获得重组杆状病毒。 PCR及WesternBlot结果显示，重组杆状病毒构建 成功并且可以表达外源蛋白RBD‑HBc。透射电镜 观察结果显示，电镜下可以看到40nm左右的病毒 样颗粒，表明本研究成功构建了呈现SARS‑CoV‑ 2RBD的病毒样颗粒，为后期疫苗的研究奠定了基 A 础。 9 1 8 1 6 6 2 1 1 N C CN 112661819 A 权　利　要　求　书 1/1页 1.病毒样颗粒，其特征在于，包括但不限于新型冠状病毒(SARS‑CoV‑2)受体结合域 (RBD)。 2.如权利要求1所述的病毒样颗粒，其特征在于，所述病毒样颗粒以HBcAg为载体，通过 杆状病毒表达系统表达。 3.如权利要求1或2所述的病毒样颗粒的制备方法，其特征在于，将SARS‑CoV‑2RBD序列 插入至乙肝核心抗原序列，连接至pFastBac Dual载体，转化到DH10Bac感受态细胞后获得 重组杆粒；将所述重组杆粒转染至sf9细胞后进行病毒拯救，获得重组杆状病毒，即获得病 毒样颗粒。 4.药物组合物，其特征在于，包括如权利要求1或2所述的病毒样颗粒或如权利要求3所 述制备方法制得的病毒样颗粒。 5.如权利要求4所述的药物组合物，其特征在于，还包括药学上可接受的保护剂、稳定 剂、佐剂、稀释剂、载体或辅料。 6.疫苗，其特征在于，包括如权利要求1或2所述的病毒样颗粒或如权利要求3所述制