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(19)中华人民共和国国家知识产权局
(12)发明专利申请
(10)申请公布号 CN 112684060 A
(43)申请公布日 2021.04.20
(21)申请号 202110052933.5 G01N 30/88 (2006.01)
C07K 14/165 (2006.01)
(22)申请日 2021.01.15
G01N 33/68 (2006.01)
(71)申请人 北京生物制品研究所有限责任公司
地址 100176 北京市北京经济技术开发区
博兴二路9号院4号楼2层205室
(72)发明人 王辉 马昱 张雅博 赵玉秀
于守智 张越 杨晓明
(74)专利代理机构 北京三友知识产权代理有限
公司 11127
代理人 刘鑫 姚亮
(51)Int.Cl.
G01N 30/02 (2006.01)
G01N 30/06 (2006.01)
G01N 30/54 (2006.01)
G01N 30/72 (2006.01) 权利要求书2页 说明书8页
序列表2页 附图2页
(54)发明名称
新型冠状病毒灭活疫苗中新型冠状病毒S蛋
白含量的检测方法
(57)摘要
本发明提供新型冠状病毒灭活疫苗中新型
冠状病毒S蛋白含量的检测方法。该检测方法利
用了本发明的定量肽段(GWIFGTTLDSK)；定量肽
段的离子对中母离子的质荷比为612.8161，子离
子的质荷比为244.1080和/或216.1080。利用该
定量肽段和定量离子对，通过高效液相色谱串联
质谱定量检测方法，S蛋白标准品制作标准曲线，
将待测新冠病毒疫苗孵育酶解后进行定量检测，
得到样品中定量肽段的子离子峰面积，进而计算
得到样品中新型冠状病毒S蛋白的含量。该方法
检测准确率高，精确度高，避免了疫苗样品中基
A 质效应等对检测的影响，能够用于新冠病毒灭活
0 疫苗各阶段中间产品及成品的新冠病毒S蛋白含
6
0
4 量检测。
8
6
2
1
1
N
C
CN 112684060 A 权 利 要 求 书 1/2页
1.一种用于液相色谱串联质谱定量检测新型冠状病毒S蛋白的定量肽段，其氨基酸序
列如下：
GWIFGTTLDSK(SEQ ID NO：1)。
2.根据权利要求1所述的定量肽段，其中，所述定量肽段的定量离子对中母离子的质荷
比为612.8161，子离子的质荷比为244.1080和/或216.1080。
3.权利要求1或2所述定量肽段在液相色谱串联质谱定量检测新型冠状病毒S蛋白中的
应用。
4.一种新型冠状病毒灭活疫苗中新型冠状病毒S蛋白含量的检测方法，其包括以下步
骤：
对重组新型冠状病毒SARS‑CoV‑2的S蛋白标准品进行孵育并进行酶解处理；采用高效
液相色谱串联三重四级杆质谱分析检测设备，进样酶解处理后的重组新型冠状病毒SARS‑
CoV‑2的S蛋白标准品，以标准品含量为横坐标，以权利要求1或2所述的定量肽段的子离子
峰面积为纵坐标绘制标准曲线；
取待测新型冠状病毒SARS‑CoV‑2的灭活疫苗样品进行孵育并进行酶解处理；将酶解后
的上清液进样检测，根据所述定量肽段的子离子峰面积，基于标准曲线和进样体积获得待
测的灭活疫苗样品中新型冠状病毒SARS‑CoV‑2的定量肽段的含量
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