自身抗体检测及应用.pptxVIP

自身抗体的检测(jiǎn cè)及意义第一页，共52页。 几个(jǐ ɡè)概念自身免疫(autoimmunity) 免疫系统针对自身成分发生免疫应答反应 出现自身抗体或致敏淋巴细胞的现象自身抗体(autoantibody) 针对自身组织、器官、细胞及其成分的抗体。自身免疫性疾病(autoimmune disease，AID) 自身免疫反应 导致组织器官损伤或功能障碍所致(suǒ zhì)疾病。免疫系统紊乱第二页，共52页。 自身(zìshēn)抗体自身免疫性疾病的重要标志高滴度存在(cúnzài)于自身免疫性疾病患者与疾病的活动性相关性参与免疫病理性改变损伤第三页，共52页。常用的检测(jiǎn cè)方法间接免疫(miǎnyì)荧光法（IIF）ELISA免疫(miǎnyì)印迹法（Western-blot）酶免疫(miǎnyì)斑点法第四页，共52页。常检测(jiǎn cè)的自身抗体类风湿因子（RF）抗核抗体（ANA）抗可提取性核抗原抗体（ENA）抗中性(zhōngxìng)粒细胞胞浆抗体（ANCA）抗环瓜氨酸抗体（CCP）抗心磷脂抗体（ACA）第五页，共52页。 类风湿因子(yīnzǐ) （RHEUMATOID FACTOR, RF） 抗变性(biànxìng)IgG Fc的自身抗体，主要类型是IgM型 检测方法： 1. 胶乳颗粒凝集实验 定性、半定量，敏感性和特异性不高，测定IgM-RF2. 速率散射比浊法（ARRAY、IMAGE） 定量、准确(zhǔnquè)、快速，测定IgM-RF 3. ELISA 定量、准确(zhǔnquè)，可测定不同类型的RF第六页，共52页。 临床(lín chuánɡ)应用： （1）RF在多种自身免疫性疾病(jíbìng)患者中均可被检出。疾病阳性率%RA79SLE30SS95Sclerosis80PM80MCTD25（2）RF滴度与RA患者临床表现呈正相关，IgM-RF效价80IU/ml并伴有严重关节功能障碍时通常提示(tíshì)患者预后不良。第七页，共52页。抗核抗体(kàngtǐ)（ANTINUCLEAR ANTIBODY，ANA）真核细胞（如HEp-2细胞、肝细胞）的各种细胞核成分(chéng fèn)为靶抗原检测的自身抗体的总称。第八页，共52页。ANA概念(gàiniàn)指抗细胞核成分（DNA，RNA，蛋白质和酶）的抗体。广义(guǎngyì)：抗核酸（Nucleic acid）和核蛋白（Nucleoprotein）抗体的总称某些核抗原成分在核仁和胞浆内比核质内更丰富第九页，共52页。ANA均质体(zhì tǐ)+中性(zhōngxìng)粒细胞DNP(DNA-Histone)+抗DNP+补体(bǔtǐ)LE细胞LE细胞：并非SLE特有，PM、SD、RA、SS等结缔组织病，药物过敏，慢活肝等亦可阳性。抗DNP取代LE细胞的检测第十页，共52页。++抗原HEp-2细胞肝组织切片待检抗体（血清）抗原—抗体第二抗体间接(jiàn jiē)免疫荧光法第十一页，共52页。荧光标记抗体病人血清（待检抗体）HEp-2细胞肝组织切片间接(jiàn jiē)免疫荧光法第十二页，共52页。分类(fēn lèi)和命名以首先检出该抗体的患者名字命名，如抗Sm、 抗Sa 抗体等；以相关疾病(jíbìng)命名，如抗Scl-70、抗SS-A、抗SS-B 抗体等；以抗原的部位命名，如抗核仁抗体、抗线粒体抗体、抗核膜抗体、抗细胞浆抗体等；以抗原的化学性质进行分类命名，如抗DNA、抗RNP、抗组蛋白抗体等。第十三页，共52页。抗核抗体(kàngtǐ)检测方法间接免疫(miǎnyì)荧光法（indirect immunofluorescence, IIF）酶免疫(miǎnyì)斑点法 ELISA 免疫(miǎnyì)印迹法 （Western-blot） 第十四页，共52页。ANA谱条法ENA斑点(bāndiǎn)法第十五页，共52页。IIF检测ANA荧光(yíngguāng)染色模型 细胞核 细胞浆 细胞骨架 细胞周期 均质型 核糖体型 肌蛋白型 中心体型 斑点型 线粒体型 波形纤维蛋白型 纺缍体型 核仁型 高尔基体型 细胞角蛋白型 纺缍丝型 着丝点型 溶酶体型 原肌球蛋白型 中间体型 周边(zhōu biān)型 颗粒型 纽带蛋白型 PCNA型 核点型(dots)