第二章-氨基酸.pptVIP

2． ?-羧基参与的反应 五、氨基酸的化学性质 ?-羧基与碱或醇作用形成成盐和成酯反应，起到掩蔽羧基，活化氨基的作用。活化的氨基容易与酰基或烃基结合，因此氨基酸的酰基化和烃基化需要在碱性溶液中进行 成盐反应 R—CH—COOH + NaOH NH2 R—CH—COONa NH2 掩蔽羧基，活化氨基 成酯反应 R—CH—COOH + C2H5OH NH2 HCl气 R—CH—COOC2H5 NH2 （1）成盐反应和成酯反应 氨基被保护后，可与二氯亚砜或五氯化磷作用生成酰氯，使羧基活化，使其容易与另一氨基酸的氨基结合，在多肽的人工合成中常用。 五、氨基酸的化学性质 2． ?-羧基参与的反应 （2）形成酰氯的反应 氨基被保护的氨基酸 氨基酰氯 氨基酰化保护后，羧基酯化成甲酯，再与肼和亚硝酸反应生成叠氮化合物，可使羧基活化，常用于多肽的人工合成中 五、氨基酸的化学性质 2． ?-羧基参与的反应 （4）叠氮化反应 代谢过程中酶催化的反应。 五、氨基酸的化学性质 2． ?-羧基参与的反应 （5）脱羧反应 氨基酸脱羧酶 味精的测定就是采用谷氨酸脱羧酶，测定CO2的量，从而确定Glu的量。 常用于氨基酸的定性或定量分析。 3．?-氨基和羧基共同参与的反应 (1)与茚三酮反应 五、氨基酸的化学性质 蓝紫色化合物（脯氨酸反应物为 黄色） 用途：是多肽和蛋白质生物合成的基本反应。 3．?-氨基和羧基共同参与的反应 （2）成肽反应：一个氨基酸的氨基与另一个氨基酸的羧基缩合成肽的过程。热力学上不能自发进行，可通过活化羧基方法使反应顺利进行 五、氨基酸的化学性质 很多侧链R基参加的反应是蛋白质化学修饰的基础：在较温和的条件下，以可控制的方式使蛋白质与某种试剂起特异反应，以引起蛋白质中个别氨基酸侧链或功能团发生共价化学改变，在蛋白质的结构与功能的研究中起重要作用 五、氨基酸的化学性质 4.侧链R基参加的反应： 2-OOC-CH-CH2-SH -OOC-CH-CH2-S-S-CH2-CH-COO- 氧化 还原 +NH3 +NH3 +NH3 半胱AA侧链上的巯基（-SH）反应性能很高，很容易被氧化，缩合成胱氨酸。二硫键（-S-S-）的形成是可逆反应，在稳定蛋白质构象上起很大的作用，氧化剂（氧化成磺基丙氨酸）和还原剂都可打开二硫键 SO3H 具有弱酸性，在较高pH条件下能够发生解离作用 在弱碱性条件下能与卤代烃反应生成稳定的羟基衍生物 能与各种金属离子形成稳定程度不同的络合物 与硝基苯甲酸二硫化合物（DTNB）反应产物在412nm处有强烈吸收，可用比色法定量 羟基的性质 丝氨酸和苏氨酸含有羟基可形成氢键；与酸形成酯 蛋白质分子中，丝氨酸常与磷酸结合成酯 丝氨酸还是大多数蛋白水解酶活性中心的主要组分，多种酰基化剂能与酶活性中心的丝氨酸羟基作用导致酶失活 咪唑基的性质 组氨酸含有咪唑基，生理条件下 具有缓冲作用 组氨酸的一个重要特性是咪唑环一侧的去质子化与另一侧的质子化同步进行，能够发生多种化学反应，如磷酰化反应、烷基化反应等 甲硫基的性质 甲硫氨酸侧链上的甲硫基是一个很强的亲核中心，容易与卤代烷等发生亲核取代反应形成烷基化产物 芳香环的性质 苯丙氨酸、酪氨酸和色氨酸分子中都含有芳香环，是一个共轭π电子体系 这三种AA在紫外区有特征吸收峰，蛋白质的紫外吸收（280nm左右）性质主要来自它们的贡献 可发生亲电取代，如碘化、硝化和重氮化反应等 六、氨基酸的分离分析 为了测定蛋白质中氨基酸的含量、组成或从蛋白质水解液中制取氨基酸，都需要对氨基酸混合物进行分析和分离工作。其方法较多，而目前使用较多的是层析法，依据是不同氨基酸的理化性质，尤其是溶解度和电离特性的差异。 一般原理：所有的层析系统都有两个相组成，一个为固定相或静相，一个为流动相或动相。 混合物在两相中的分离决定于混合物的组分在这两相中的分配情况，一般用分配系数来描述：当一种溶质在两种互不相溶的溶剂中进行分配时，在一定温度下达到平衡后，溶质在两相中的浓度比值为一常数，即分配系数（Kd）。用下式表示： CA ← 表示某一物质在动相中的浓度 Kd=——— CB ←表示某一物质在静相中的浓度 （一）分配层析 分配层析 用载体固定固定相并作为流动相支持物，流动相向前流动过 程中，溶质在两相依分配系数不断分配、流动，使得分配系数不 同的混合溶质彼此分开的方法。 载体 常用纤维素、淀粉、硅胶等 固定相 常用水 流动相 常用与水不