基因工程-载体课件.pptx

第三章 基因工程载体第一页，编辑于星期日：点 四十一分。基因工程载体的概念把一个有用的基因（目的基因——研究或应用基因）通过基因工程手段送到生物细胞（受体细胞），需要运载工具（交通工具）携带外源基因进入受体细胞，这种运载工具就叫载体。作为基因工程载体，质粒至少应该具备复制的起始区、选择标记基因区、多克隆位点等部分。复制的起始区：能在宿主细胞内进行独立和稳定的自我复制。选择标记基因区：可以筛选重组体。多克隆位点：方便外源基因的插入。第二页，编辑于星期日：点 四十一分。第一节 质粒载体质粒（plasmid）：是独立于染色体以外的能自主复制的双链闭合环状DNA分子。广泛存在于细菌、霉菌、蓝藻、酵母等细胞中。质粒染色体质粒的一般生物学特性：分子大小差异大：1—200 kb编码基因少：2—3个中等大小的蛋白质。如抗菌素抗性、代谢特征等，赋予细菌一些额外的特性（非必须）。形状：双链环状DNA；线性双链DNA；超螺旋等。第三页，编辑于星期日：点 四十一分。质粒的空间构型：质粒空间构型与电泳速率：同一质粒尽管分子量相同，不同的构型电泳迁移率不同，scDNA最快、lDNA次之、ocDNA最慢。共价闭合环状DNA（Covalent close circular DNA，cccDNA)，呈超螺旋（SC）（super coil）开环DNA（open circular，ocDNA），一条链上有一至数个缺口线