生物药物分析与检测 抗生素药物分析.pptVIP

（一）茚三酮反应 本类药物具有羟基胺结构和α-氨基，可与茚三酮缩合，生成蓝紫色化合物。 取庆大霉素5mg，加水1ml，0.1%茚三酮的水饱和正丁醇溶液1ml，吡啶0.5ml，水浴加热5min，显紫色。 （二）Molisch试验 具有五碳糖或六碳糖结构的氨基糖苷类抗生素经酸水解后，在盐酸或硫酸作用下脱水，成糠醛（五碳）或羟甲基糠醛（六碳糖）。这些产物遇a-萘酚或蒽酮成色。 第三节 氨基糖苷类抗生素 二、鉴别试验 * （三）N-甲基葡萄糖胺反应（Elson-Morgan反应） 链霉素水解产物N-甲基葡萄糖胺在碱性溶液中与乙酰丙酮缩合成吡咯衍生物，与二甲氨基苯甲醛的酸性醇溶液反应，即生成红色化合物。 （四）麦芽酚（Maltol）反应 链霉素在碱性溶液中，链酶糖经分子重排，消除N—甲基葡萄糖胺及链酶胍，生成麦牙酚，麦牙酚可与铁离子在微酸性溶液中形成紫红色配位化合物。 第三节 氨基糖苷类抗生素 二、鉴别试验 * （五）坂口反应 本品水溶液，加氢氧化钠试液，水解为链酶胍，与8—羟基喹啉作用，再加次溴酸钠试液，生成橙红色化合物。 （六）硫酸盐反应 本类药物多为硫酸盐，可利用硫酸盐与氯化钡试液生成白色硫酸钡沉淀进行鉴别。 第三节 氨基糖苷类抗生素 二、鉴别试验 * （七） TLC法 中国药典2005版采用该法对硫酸庆大霉素进行鉴别。方法：取供试品溶液和对照品溶液各2μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，用氯仿-甲醇-氨水（1:1:1）的下层混合液为展开剂，展开后，晾干，置碘蒸气中显色，供试品溶液和对照品溶液所显斑点的颜色和位置应一致。 （八）光谱法 采用红外光谱法可鉴别庆大霉素。庆大霉素无紫外吸收，而链霉素可采用紫外法鉴别，λmax=230nm。 第三节 氨基糖苷类抗生素 二、鉴别试验 * 取本品适量，精密称定，加水制成含0.65mg·ml-1的溶液，取4ml置10ml容量瓶中，加异丙醇2ml与邻苯二醛试液1.6ml，用异丙醇稀释至刻度，摇匀，置60℃水浴中加热15min，冷却，滤过，量取滤液10μl注入高效液相色谱仪，记录色谱图。另取庆大霉素标准品，同法测定。C组分的保留时间依次为：C1、C1α、C2α、C2。量取C1、C1α、C2α、C2的峰高，按峰面积归一化法计算： 第三节 氨基糖苷类抗生素 三、特殊杂质检查及组分分析 规定：C1 应为25~50%，C1a应为15~40%，C2a +C2应为20~50%。 * 目前各国药典均采用微生物检定法测定本类药物的效价。本法系利用抗生素在琼脂培养基内的扩散作用量反应平行线原理的设计，比较标准品与供试品两者对接种的试验菌产生抑菌圈的大小，以测定供试品效价的一种方法。 第三节 氨基糖苷类抗生素 四、含量测定 * （一）化学结构 四环素类抗生素具有十二氢化并四苯基本结构，属于广谱抗菌药物。 第四节 四环素类抗生素 一、化学结构与性质 药物名称 R R1 R2 R3 四环素 金霉素