生物化学 第二章 蛋白质化学.pptVIP

（2）化学裂解法 溴化氰(CNBr)只断裂Met羧基参与形成的肽键。由于大多数蛋白质只含有很少的Met，因此CNBr断裂产生的肤段不多。 * Sample * DNP-Glu * * * * 蛋白质的化学合成 * * * 最早发现的氨基酸是ASP（1806），最后一种是Thr（1938） pK1=2.19 pKR=4.25 pK2=9.67 * * * * 必需氨基酸 人体（或其它脊椎动物）必不可少，而机体内又不能合成的，必须从食物中补充的氨基酸，称必需氨基酸。 对成人来说，这类氨基酸有8种，包括赖氨酸、蛋氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、苏氨酸、缬氨酸、色氨酸和苯丙氨酸。对婴儿来说，组氨酸和精氨酸也是必需氨基酸。  * 请记住上述必需氨基酸 携（缬）一（异）两（亮）本（苯）单（蛋）色书（苏）来（赖）——携一两本单色书来 笨蛋来宿舍晾凉鞋 * 茚三酮反应 氨基酸与茚三酮水合物共热，可生成蓝紫色化合物，其最大吸收峰在570nm处。由于此吸收峰值与氨基酸的含量存在正比关系，因此可作为氨基酸定量分析方法。 氨基酸参与的化学反应 * 氨基酸与茚三酮反应 但脯氨酸与茚三酮反应生成黄色 * 纸层析法 * 氨基酸与2,4一二硝基氟苯(DNFB)的反应（sanger反应） DNFB（dinitrofiuorobenzene） DNP-AA(黄色) + + HF 弱碱中 氨基酸 * 氨基酸与苯异硫氰酯（PITC）的反应（Edman反应） PITC（phenylisothiocyanate） + 苯乙内酰硫脲衍生物(PTH-AA) （phenylisothiohydantion-AA） 弱碱中 (400 C) (硝基甲烷 400 C) H+ * 第二节 肽 肽是氨基酸通过肽键连接在一起形成的化合物。通常把分子量小于10000的称为肽，而分子量更大的称为蛋白质。 * 肽键(peptide bond) * 氨基末端 羧基末端 Ser-Gly-Tyr-Ala-Leu 氨基酸残基 * 几种生物活性肽 1. 谷胱甘肽(glutathione, GSH) GSH是体内重要的还原剂 * GSH过氧化物酶 H2O2 2GSH 2H2O GSSG GSH还原酶 NADPH+H+ NADP+ 谷胱甘肽在体内参与氧化还原过程，作为某些氧化还原酶的辅因子，或保护巯基酶，或防止过氧化物积累。 * 体内许多激素属寡肽或多肽 2. 多肽类激素及神经肽 由下丘脑分泌，其功能是促进腺垂体释放促甲状腺素(调节糖代谢)。 * 当我们搬进一个新寝室时，我们会如何向我们的外校的同学对其进行描述？ * 当你看到这张图片时，你怎么向别人描述？ * 第三节 蛋白质的结构 蛋白质的分子结构包括 一级结构(primary structure) 二级结构(secondary structure) 三级结构(tertiary structure) 四级结构(quaternary structure) * * 蛋白质结构的主要层次 一级结构 四级结构 二级结构 三级结构 primary structure secondary structure Tertiary structure quariernary structure 超二级结构 结构域 supersecondary structure Structure doman * 一级结构是蛋白质空间构象和特异生物学功能的基础。 蛋白质一级结构 * 蛋白质一级结构测定 流程： 确定多肽链的数目 拆开并分离出每条肽链 水解测定肽链的氨基酸组成 测定肽链两末端氨基酸残基 肽链水解为小片段并测序 片段重叠得出整个肽链的序列 确定二硫键的位置 * 肽链末端分析 N-末端测定（1）DNFB法 　（2）PTH法 * DNP-氨基酸 * * C-末端测定 （1）肼解法 缺点：Asn，Gln，Cys被破坏，Arg转变为鸟氨酸。 * （2）羧肽酶法 羧肽酶能特异水解C末端氨基酸残基，其中羧肽酶A能释放除Pro，Arg，Lys以外所有的氨基酸残基，羧肽酶B只能水解以Arg和Lys为C末端残基的肽链。 * 二硫键的断裂 * * 肽链的断裂 （1） 酶裂解法 * 第二章 蛋白质化学 * 第一节 氨基酸 氨基酸的通式 *