分子标记在植物遗传育种中的应用.pptxVIP

分子标记及其在植物遗传育种中的应用;;形态标记;细胞学标记;生化标记——贮藏蛋白和同工酶;分子标记;分子标记的分类〔Staub等1996〕;植物遗传研究中常用的分子标记;RFLP;酶切：3-5ug DNA，以10U内切酶酶切5小时 电泳：0.6-0.8%琼脂糖胶70V电泳16小时 染色：EtBr染色20分钟 变性：0.25M HCl 20分钟，抽真空，水冼 印迹：参加0.4N NaOH，进行Southern 印迹 冲洗：以2×SSC 冼胶，风干;—杂交—洗脱;—放射自显影;RFLP探针;探针标记—随机引物法;RFLP标记特点;RAPD;Polymerase Chain Reaction-PCR;RAPD的操作;Step1 95℃ 2分钟 Step2 95℃ 15秒 Step3 36℃ 30秒 Step4 72℃ 45秒 Step5 GOTO Step2 46循环 Step6 72℃ 5分钟 ?;主要特点;DAF(DNA amplification fingerprinting)：;AP-PCR(arbitrarily primed polymerase chain reaction);ISSR;共同优点： 在不需要知道所扩增DNA序列情况下，产生DNA片段的指纹；