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预防新生儿B族链球菌（GBS ）感染要点 预防新生儿GBS感染 图1. B-溶血程度不同的GBS在哥伦比亚血平皿生长24 图1. B-溶血程度不同的GBS在哥伦比亚血平皿生长24小时后菌落形态 图2. CAMP实验左上方：粪肠球 菌（阴性对照CAMP阴性）；左下方： GBS（CAMP实验阳性，出现箭头型 透明溶血区）；右方垂直划线为金黄 色葡萄球菌标准菌株 图3 . GBS在不同显色培养基上分 别呈橙色类胡萝卜素色（上中）或紫 色（下右），在普通哥伦比亚血平皿 上呈B-溶血环的白色半透明菌落 （下左）；图中箭头所指为GBS B族链球菌（GBS）,亦称无乳链球菌，定植于健康人群的下消化道 与泌尿生殖道，健康人群的携带率与种族区域有关，欧美国家携带率为 8%~35% ,明显高于亚洲。20世纪70年代以来，GBS引起新生儿感染 广受重视。 近年来，欧美国家强化预防，新生儿GBS感染得到有效控制，但在 免疫功能低下人群或老年人群的严重感染呈上升趋势。在我国，孕产妇人 群常规筛查GBS并未普及，国内相关研究资料较少。下文主要介绍实验 室筛查技术和预防控制措施。 GBS感染的流行 GBS为围产期新生儿重要的致病菌之一。经阴道分娩的新生儿，如母 体生殖道或直肠携带GBS ,在分娩过程中，80%新生儿可携带该菌。GBS 可引起严重新生儿感染，如脑膜炎、脓毒症、新生儿肺炎等疾病，其死亡 率高达50% ,特别是在早产儿或低体重儿中，感染率与死亡率更为突出。 目前，欧美等发达国家推荐对妊娠妇女是否携带GBS进行产前筛查。美 国疾病预防控制中心于2010年推出的GBS防治指南中明确提出，应对 35 ~ 37孕周的妇女进行阴道-直肠GBS定植筛查。 GBS引起新生儿感染分为两类：早发型感染(EOD )与晚发型感染 (LOD ) o EOD发生于新生儿出生1周内，而LOD发生于出生后第7天 至3个月内。EOD的发病率为( 1 -4)/1000,死亡率为15% ,而低体 重儿的死亡率可高达30% ~ 50%o上世纪80年代中期以来，大量临床研 究表明，对携带GBS的孕产妇在分娩期间进行抗生素预防，可有效阻断 新生儿的GBS感染(主要是EOD ,但对LOD发病率无明显影响)。 孕产妇B族链球菌实验室筛查 样本采集方式 在孕期35 ~ 37周孕妇的阻道下端与直肠（通过肛门括约肌）进行拭 子采集，可提高GBS筛选的阳性率。 采集的样本应放入专门的转运管中，在培养前置于4。C条件下，并于 24小时内进行增菌。 若不能及时处理，采集后的拭子在转运肉汤（多直接选用选择性增菌 肉汤）中，室温下可存活数日，但检出率随着时间延长下降。若放于高温 条件下，检出率将受到严重影响。 样本处理 无论采用何种方法鉴定GBS ,采集后的样本均应放入选择性增菌肉汤 内增菌，可显著提高GBS的检出率。若采集样本直接涂布于哥伦比亚血 平皿上，检出率仅为增菌后的50%o 选择性增菌肉汤以Todd-Hewitt（THB）为代表。培养肉汤加有蔡咤 酸（15 μg∕ml）与庆大霉素（8 μg∕ml）或蔡咤酸（15 μg∕ml）与多黏 菌素（10 μg∕ml） o 将有采集样本的THB放入36℃ , 5%CO2的条件下孵育24小时，若 发现肉汤有浑浊，可涂布于血平皿上放回C02孵箱生长，若未见浑浊， 可将THB继续孵育24小时，再涂于血平皿（见图1 ）。 GBS鉴定 GBS增菌后可在血平皿上良好生长，根据菌落形态、革兰染色（阳性 球菌）、触酶试验（阴性）等初步判断。可采用乳胶凝集法直接检测链球 菌兰斯非尔德（IanCefieId ）抗原，亦可采用生化鉴定。GBS鉴定方法如 下。 .cAMP试验 GBS可产生环磷酸腺昔（CAMP）因子，此物质促进 葡萄球菌P-溶血素的活性。因此，可在两种细菌的交界处溶血力增强，出 现箭头型透明溶血区。在羊血琼脂平板上先将P-溶血的金黄色葡萄球菌划 一横线接种。再将待检菌与其垂直接种,两者应相距ICm ,于35℃孵育 18~24小时,GBS菌落出现阳性反应（见图2 ）。 .显色培养肉汤 在选择性增菌肉汤内添加显色底物，若有GBS生 长，则肉汤显色（如Carrot肉汤可显桔红色），有助于快速发现GBS , 特异性可达Io0% ,是一种省时省力又快速的检测方法,但是该方法有4% 的非溶血性GBS菌株呈假阳性。 .显色培养基 GBS在格拉纳德（Granada ）培养基上呈现橙色类 胡萝卜素色（granadaene ）,色素的产生与GBS的β-溶血有关，利用这一原理可进行GBS筛选。显色培养基颜色分明，易于判别，但有5% ~ 8% 的GBS菌株（非β-溶血GBS ）并不产生该色素，因此注意筛查过程中漏 诊的GBS （图3 ）。 .核酸检测目前，GBS筛查采用常规培养方法，