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发酵罐和灭菌方法;经典发酵设备 ;一 发酵设备概述;(一)发酵罐 ;;; 发酵罐系统;发酵罐特点 ;发酵罐基础类型;;;发酵罐工艺操作条件 ;发酵设备及检测控制系统 ?? B|Braun企业;Biostat B2;Pilot Biostat UD50;中国、外发酵设备企业;
通常认为500L以下是试验室发酵罐;
500-5000L是中试发酵罐;
5000L以上是生产规模发酵罐。;现代发酵工程规模;(二)发酵辅助设备 ;1、无菌空气系统;发酵生产中制备无菌空气大致过程 ;高空取气管 ;油水分离器;两级分离、冷却、加热空气除菌步骤 ;高效前置过滤除菌步骤 ;空气净化步骤;空气压缩机: 现在常见是往复式空压机
过滤器: 空气过滤器类型很多, 有棉花活性炭过滤器、管式过滤器和接送式过滤器等。
过滤介质: 空气除菌用过滤介质有: 棉花、活性炭玻璃纤维, 超细玻璃纤维纸, 石棉滤板、烧结材料、聚乙烯醇(PVA)等多孔合成树脂、素烧陶瓷筒和聚碳酸酯等。;培养基;培养基类型;2、培养基灭菌 ;;3)连消;
加热设备: 在配料罐里培养基被加热到70℃, 然后, 用泵送到加热设备, 在20秒时间内继续加热到130~140℃。常见加热设备有塔式和喷射式两种。
塔式加热设备又称连消塔, 塔有效高度2~3m, 料液在塔中流速是0.1m/s, 所以料液在塔内滞留时间为2~30s。
喷射式加热器有一喷嘴, 蒸汽由喷嘴喷出, 料液从侧面进入加热器而被蒸汽加热。; 维持设备
维持设备使加热后培养基保温—定时间, 从而达成灭菌目。
维持设备有两种: 罐式和管式。罐式是一个带有上下开口用于进出料立式密封容器; 管式是用无缝钢管焊成, 管内流速可取0.3~0.6m/s。; 冷却设备
①喷淋冷却器
②套管冷却器
③板式换热器
④螺旋板换热器;4)影响培养基灭菌原因 ;;;5)高温对培养基成份有害影响及其预防 ;消除高温有害影响方法;3、管道及阀门 ;阀门: 阀门是发酵罐关键组成, 它被用于调整控制气体和液体流量。
阀门选择应考虑:
①用于什么目;
②阀门材料是否耐温、耐压等;
③连接方法;
④经济成本;
⑤操作方法。
;第二部分: 消毒与灭菌;热力灭菌法
辐射杀菌法
滤过除菌法
超声波杀菌法
干燥与低温抑菌法;干热灭菌法— 焚烧: 废弃物、尸体
灼烧: 接种环、试管口
干烤: 玻璃器皿
红外线: 医疗器械
湿热灭菌法(moist heat sterilization)— 巴氏消毒法: 61.6-62.8 ℃30min或71.7℃15-30s,关键用于牛乳消毒。
煮沸法; 流动蒸汽消毒法
间歇蒸汽消毒法; 高压蒸汽灭菌法;紫外线
波长200-300nm紫外线含有杀菌作用。
其关键作用于DNA, 使一条DNA链上相邻两个胸腺嘧 啶共价结合形成二聚体, 造成细菌变异和死亡。
电离辐射
高速电子、X射线、γ射线
微波
波长1mm~1m;赛氏滤器
玻璃滤器
薄膜滤器
; 是一个机械作用原因, 每秒超出2万次振动声波即为超声波。常见超声波发生器能产生20-100千赫声波, 可使细菌细胞壁裂解而死亡。; 干燥法
低温法: 低温可使细菌新陈代谢减慢, 常见作保留细菌菌种。冷冻真空干燥法是现在保留菌种最好方法。;消毒剂种类: 酚类、醇类、重金属盐类、氧化剂、表面活性剂、烷化剂。
消毒剂应用: 病人排泄物与分泌物、皮肤、粘膜、饮水、厕所、空气、手。;消毒剂性质、浓度与作用时间
微生物种类与数量
温度
酸碱度
有机物
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