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- 2021-11-16 发布于河北
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肝硬化患者HBsg定量检测的分析
XX】R33.1 XX】 XX】1005-0515(20XX)07-0177-01 乙肝表面抗原(HBsg)是病毒颗粒的外膜组成部分,是由S基因编码的外膜蛋白。HBsg是患者感染HBV病毒后最早出现的血清学标志,HBsg的血清学转换是乙肝患者治愈的金标准。乙肝病毒共价闭合环状DN(HBV CCCDN)是HBV前基因组RN转录产物最原始的模板,是乙肝病毒持续感染的关键因素,因此,它也是乙肝病毒复制最特异的指标。但目前通过肝活检来检测患者肝组织中的HBV CCCDN水平在实际临床应用中仍相当困难,故探讨能反映其水平的非侵入性替代检测指标非常具有现实意义。有文献报道[1,2]HBVcccDN与血清HBsg水平及血清HBV DN水平相关,HBsg定量检测可作为替代标记。本研究旨在分析肝硬化患者中HBsg定量与HBV DN、HBeg水平的相关性,以期找到一种有效、廉价、方便的替代标记对HBV病毒的复制状况进行评估,作为HBV DN检测的一项重要补充。 1 资料与方法 1.1 标本来源:收集我院感染科、消化内科乙肝相关性肝硬化患者血清标本60例纳入实验对象,并以慢性乙型肝炎携带者血清标本20例作为对比组。所有患者的诊断均符合2000年9月(西安)第10次全国病毒性肝炎学术会议修订的《病毒性肝炎防治方案》中的诊断标准。肝硬化患者根据诊断标准分为肝硬化代偿期组(n = 35)和肝硬化失代偿期组(n =25)。所有标本均应排除以下疾病:①甲、丙、丁、戊型肝炎病毒感染;②自身免疫性肝炎;③肝豆状核变性;④原发性胆汁性肝硬变;⑤药物或酒精中毒引起的肝硬化;⑥既往有抗病毒用药史;⑦保肝药应用大于一周;⑧合并其他部位的疾病,如糖尿病、高血压、心血管疾病、肺部疾病;⑨合并肝脏肿瘤及其他部位的肿瘤。 1.2 检测方法:HBsg和 Hbeg定量检测:应用电化学发光免疫分析法(ECLI)测定患者血清中HBsg和HBeg滴度,仪器为罗氏Elec-sys20XX,试剂由罗氏公司生产。HBV-DN检测:应用免疫荧光定量PCR法检测HBV DN载量,仪器为PE5700荧光定量PCR系统,试剂由中山大学达安基因股份有限公司生产,正常参考值 1.3 统计学处理:应用Microsoft ccess软件建立数据库,整理后用SPSS 11.5统计软件包进行分析。组间比较运用单因素方差分析,组内相关性运用Person相关分析进行处理。数据以均数±标准差(x±s)表示,相关系数用r表示,取P=0.05为检验标准,P 2 结果 2.1 HBsg、HBV DN及 HBeg的检测结果:HBsg滴度在携带者组最低,肝硬化代偿期组次之,肝硬化失代偿期组中最高。三组之间比较均有明显差别(P 2.2 HBsg与HBV DN、HBeg的相关性:携带者组HBsg与HBV DN、HBeg间呈负相关(P 3 讨论 乙肝表面抗原(HBsg)是由混合糖蛋白组成的外膜蛋白,在HBV感染的患者血中有三种类型的病毒颗粒存在,即Dne颗粒、球形颗粒、管状颗粒。其中Dne颗粒为完整的病毒颗粒,由HBV DN和HBsg等组成,球形颗粒、管状颗粒为外膜颗粒,仅由HBsg组成。通常血清中球形颗粒最多,Dne颗粒最少。即使在病毒活跃复制的病人,含病毒核心的Dne颗粒(病毒颗粒)也远较空缺的外膜颗粒(球形颗粒、管状颗粒)少。因此HBsg常作为HBV感染的标志。 本试验发现,HBsg滴度在携带者组最低,肝硬化代偿期组次之,肝硬化失代偿期组中最高,三组之间比较均有明显差别。提示随着肝病的进展,HBsg滴度逐渐上升,肝病程度越重,均值越高。原因可能为高滴度的HBsg更容易诱导机体进入免疫活跃期进而导致肝脏的严峻损伤。研究表明,HBsg“” 决定簇为主要抗原决定簇,能刺激机体产生强烈的免疫应答,引起肝脏损伤和HBV DN的下降。因此,高浓度的HBsg和低水平的HBV DN可能预示着肝脏发生严峻的免疫损伤。 HBV DN 和 HBeg水平是反映病毒复制状态的重要指标。HBV携带者处于免疫耐受期,体内的病毒复制活跃,HBV DN 和 HBeg水平较高。肝硬化代偿期患者处于免疫清除期或低复制期,大量的病毒被清除且复制能力明显下降,致HBV DN 和 HBeg水平降低。肝硬化失代偿期组患者处于低(非)复制期,病毒复制水平低下,HBV DN 和 HBeg水平也相对较低。本试验中,携带者组HBV DN和HBeg水平最高,肝硬化代偿期组次之,肝硬化失代偿期组最低。表明HBV DN和HBeg水平随肝病的进展有
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