生物化学实验五酵母核糖核酸的分离及组分鉴定.docxVIP

实验五酵母核糖核酸的分别及组分判定 一、目的要求 学习和掌握稀碱法提取酵母 RNA的原理和方法；认识核酸的组分，并掌握判定核酸组分的方法。 二、实验原理 酵母核酸中 RNA含量许多。 RNA可溶于碱性溶液，在碱提取液中加入酸性乙醇溶液能够使解聚的核糖核酸积淀，由此即获得 RNA的粗制品。 核糖核酸含有核糖、嘌呤碱、嘧啶碱和磷酸各组分。加硫酸煮沸可使其水解，从水解液中能够测出上述组分的存在。 三、器械与试剂 1〉资料 酵母粉。 2〉器械 乳钵、 150ml 锥形瓶、水浴锅、量筒、吸管、洗耳球、漏斗、滴管、试管、试管架、烧杯、离心计、滤纸、试管夹。 3〉试剂 (1) 氢氧化钠溶液。 (2)酸性乙醇溶液：将 0.3ml 浓盐酸加入 30ml 的乙醇中。 (3)95%乙醇。 (4)乙醚。 (5) 1 / 4 硫酸溶液。 (6)浓氨水。 (7) 硝酸银溶液。 (8)三氧化铁 -浓盐酸溶液： 将 2ml 10%三氧化铁溶液 (用 FeCl 3·6H 2O 配制 )加入到 400ml 浓盐酸中。 (9)苔黑酚乙醇溶液： 溶解 6g 苔黑酚于 100ml 95%乙醇中。 (10)定磷试剂。 a.17%硫酸溶液： 将 17ml 浓硫酸 (比重 1.84)慢慢加入到 83ml 水中。 b. 2.5%钼酸铵溶液：将 2.5g 钼酸铵溶于 100ml 水中。 c.10%抗坏血酸： 将 10g 抗坏血