分子克隆工具酶 (2).pptVIP

位点偏爱（Site preference） 某些限制酶对同一介质中的有些位点表现出偏爱性切割，即对不同位置的同一个识别序列表现出不同的切割效率的现象称作位点偏爱。 第三十页，共77页 1.5 限制酶的用途 1.???? 在特异位点上切割DNA，产生特异的限制片断 2.???? 建立限制酶（物理）图谱绘制 3.???? 构建基因文库 4. 用限制酶切出相同的粘性末端，以便重组 第三十一页，共77页 2 DNA连接酶 2.1 定义及功能 2.2 种类及作用机理 2.3 使用时的注意事项 第三十二页，共77页 2.1 定义及功能 DNA连接酶（DNA ligase）：可使一段DNA的3` 羟基末端和5`磷酸末端形成3`，5`- 磷酸二酯键，把两个DNA片段连在一起，封闭DNA双链上形成的切口的酶。 DNA连接酶是1967年在三个实验室同时发现的。 J:\生物视频\细胞生物学视频\连接酶\DNA连接酶. J:\生物视频\细胞生物学视频\连接酶\连接酶.swf 第三十三页，共77页 OH P 5` 3` 3` 5` 5` 3` 3` 5` DNA ligase DNA ligase 连接缺刻(nick) 第三十四页，共77页 DNA连接酶 连接的部位：磷酸二酯键（梯子的扶手），不是氢键（梯子的踏板）。