减数分裂的观察.ppt

实验七 减数分裂的观察 1、熟悉减数分裂各时期的形态学特点，加深对减数分裂遗传学意义的认识； 2、学习减数分裂制片方法，了解动、植物生殖细胞的形成过程。 一、实验目的 减数分裂是一种特殊方式的细胞分裂，只发生在生殖细胞形成的过程中。减数分裂的特点是连续进行两次核分裂，而染色体仅复制一次，从而形成四个只含单倍数染色体的生殖细胞，经过受精之后，合子中的染色体数目又恢复到二倍体水平，因此它是维持大多数动植物品种染色体数目世代稳定传递的根本机制。另一方面，基因的分离、自由组合以及交换无不是通过减数分裂发生的，所以深入认识减数分裂对学习遗传学基本规律是极为重要的。 二、实验原理 植物在花粉形成过程中，花药内的一些细胞分化成小孢子母细胞，即花粉母细胞（2n）， 每个花粉母细胞进行连续的两次细胞分裂，产生四个细胞，即具单倍体染色体数（n）的小孢子或花粉。动物的精细胞是在精巢由精母细胞经减数分裂形成。卵细胞则在卵巢由卵母细胞经减数分裂形成。 在适当时期采集植物花蕾或雄花序、动物精巢或卵巢，经固定，染色制片后，即可在显微镜下观察到减数分裂不同时期的染色体图像。 减数分裂的连续两次分裂都包括前期、中期、后期、末期等各个时期，但第一次分裂的前期特别长，而且变化最为复杂，又可分为细线期、偶线期、粗线期、双线期和终变期，出现同源染色体的配对、交换等现象。 下面以百合花粉母细胞减数分裂为例，对各时期特征作一简要说明。 前期Ⅰ 细线期：减数分裂的开始时期，染色质开始浓缩为细而长的细线状，且细线局部可见到念珠状颗粒，即染色粒。此时，虽然染色体已经复制，但在显微镜下还看不出结构上的二价性。 偶线期：同源染色体开始配对。染色体形态与细线期差别不大。在显微镜下不易与细线期绝对分开，但可根据其染色体分散状态及粗细变化判断其是靠近细线期还是趋于偶线期。 粗线期：染色体明显缩短变粗。这时同源染色体配对已完成，联会的两条同源染色体结合很紧密，以致结合的界限不易分清。 双线期：配对的同源染色体开始分离。由于同源染色体间发生过交换，此时可观察到交叉现象。此期染色体图像呈现纽花状。 终变期：由于交叉端化，二价体往往呈X、O、V状态，且显著收缩变粗，并向核周边移动，在核内较均匀地分散开。所以此期有利于染色体计数。 此外，花粉母细胞在整个前期Ⅰ都具有较大，较明显的核仁，这是前期的一个明显特征，进入中期核膜、核仁才开始消失。 中期Ⅰ：各个二价体排列在赤道面上，纺锤体形成。 后期Ⅰ：同源染色体分开，移向两极，每一极得到n条染色体，每一条染色体具两个姊妹染色单体。此时，染色体数目减半。 末期Ⅰ：染色体解螺旋，核膜重新形成，胞质分裂，成为二分体。此期较短，再经短暂的间期即进入减数分裂Ⅱ。 减数分裂Ⅱ：这一次分裂基本与普通有丝分裂相同，前期Ⅱ较短。中期Ⅱ染色体排列于赤道面，两条染色单体分开，着丝粒分裂，移向两极，末期Ⅱ两极各有n条染色体，染色体解螺旋，形成核膜，出现核仁，胞质分裂，形成小孢子四分体，进一步发育为成熟的花粉。 三、仪器与材料 材料：小麦或玉米的花序固定材料。 器具：显微镜、解剖针、镊子、刀片、恒温箱、载玻片、盖玻片、染色缸、试剂瓶、酒精灯、纱布、吸水纸 试剂：无水乙醇、冰醋酸、卡诺固定液（同实验一）、蒸馏水、醋酸洋红、改良品红。 四、实验程序 （1）取材固定：掌握各植物的最适时期和最适时间，保证大量花粉母细胞处于减数分裂时期；取出的花穗立即放入卡诺固定液中，在低温处用卡诺固定液固定2-24小时，用70%乙醇保存于冰箱中。 （2）取花穗：选取处于减数分裂时期的花穗。 （3）解离染色：取出花药吸去多余液体，放在载玻片上，加一滴醋酸洋红，用镊子反复挤压花药，使花粉母细胞完全溢出来，尽可能去除残渣药壁，染10分钟左右，使染色体充分着色。 （4）压片：盖上盖玻片，用刀片架起盖玻片一角，中指和食指按住盖玻片边缘，用镊子尖轻敲几下，使花粉母细胞分散，移去刀片，在酒精灯上迂回稍加热后，用手指垂直压片。 （5）观察：在显微镜下观察花粉母细胞减数分裂的各个时期的图象。 [重要实验步骤]： 本实验主要分2步骤，先通过快速简易的检查，挑出处于减数分裂时期的花药。第2步，剩余的2个花药染色，常规压片、镜检。