急性白血病外周血T细胞CD28和CD137的表达.docVIP

急性白血病外周血T细胞CD28和CD137的表达 目录 TOC \o 1-9 \h \z \u 目录 1 正文 1 文1：急性白血病外周血T细胞CD28和CD137的表达 1 1对象和方法 2 文2：慢性乙型病毒性肝炎患者外周血T淋巴细胞亚群CD27和CD28的表达 4 1 材料与方法 6 2 结果 7 3 讨论 8 参考文摘引言： 10 原创性声明（模板） 11 文章致谢（模板） 12 正文 急性白血病外周血T细胞CD28和CD137的表达 文1：急性白血病外周血T细胞CD28和CD137的表达 0引言 CD28和CD137（41BB）是迄今发现的T细胞上两种最重要的共刺激分子，它们分别与抗原递呈细胞（APC）上的B71（CD80）和CD137L结合，协同MHCAg信号，提高肿瘤细胞免疫原性，后者包括促进T细胞增殖，分泌细胞因子及增强细胞毒活性（CTL）［1-4］. 这种共刺激分子介导的协同刺激通路虽然是非特异性的，但在抗肿瘤免疫反应中不可缺少［5-7］. 目前对CD137的研究多为小鼠，鲜见人类血液肿瘤共刺激分子的研究报道. 我们检测了急性白血病（AL）患者常规化疗前后外周血T细胞表面CD28和CD137的表达，并分析了T淋巴细胞亚群变化情况，旨在探讨其与临床疗效的关系. 1对象和方法 对象200201／200302住西安 交通 大学第二 医院 AL患者（初治或复治）38（男20，女18）例，中位年龄35（21～44）岁，均经临床表现、骨髓及外周血细胞形态和细胞化学染色确诊. 其中，CR（完全缓解）10例，PR（部分缓解）13例，NR（未缓解）15例. 急性非淋巴细胞白血病（ANLL）26（男14，女12）例，中位年龄36岁. 急性淋巴细胞白血病（ALL）12（男6，女6）例，中位年龄33岁. 均经常规联合化疗，疗效标准依据 参考 文献 ［8］. 正常对照者（均为献血者）25（男14，女11）例，中位年龄32（23～42）岁. 经检验，正常对照组在年龄、性别构成上与各白血病组无显著差异. 小鼠抗人CD137 mAb，FITC标记绵羊抗小鼠Ig，FITC标记小鼠抗人CD28 mAb及FITC标记CD3，CD4，CD8 mAb均为Pharmingen公司产品. 流式细胞仪为BD公司产品. 方法取肝素抗凝的AL患者或对照者外周血5 mL，采用FicollHypaque密度梯度离心法分离单个核细胞，再经尼龙棉柱过滤法纯化T细胞，调整细胞密度为1×1010#12539;L-1. 取含1×106细胞的待检标本100 μL放入试管中，加10 μL FITC标记小鼠抗人CD28 mAb，室温孵育30 min，PBS洗涤3次，用FACS检测T细胞上CD28表达. 另外，取含1×106细胞的待检标本100 μL放入试管中，加入10 μL 1∶10稀释的小鼠抗人CD137 mAb（ g#12539;L-1），室温孵育30 min，PBS洗涤3次，再加入100 μL 1∶50稀释的FITC标记绵羊抗小鼠Ig，作用30 min后PBS洗涤3次，用FACS检测T细胞上CD137表达. FACS分析T淋巴细胞亚群：取以上细胞悬液100 μL分别加入FITC标记CD3，CD4，CD8 mAb 10 μL进行标记，室温孵育30 min，PBS洗涤3次，用FACS检测. 统计学处理：数据均用x±s表示，采用SPSS 软件，组间比较采用t检验或t′检验，同一病例治疗前后比较采用配对资料t检验 2结果 患者 治疗 前CD28，CD137表达及T淋巴细胞亚群AL组CD28，CD3，CD4，CD4/CD8均较对照组显著降低，而CD137显著增高（P，Tab 1） 患者临床疗效与CD28，CD137表达及T淋巴细胞亚群治疗后CR组、PR组CD28，CD3，CD4，CD4/CD8较其治疗前显著增高而CD137显著降低（P），CR组接近对照组，而NR组较其治疗前几无变化（P，Tab 1） 表1AL患者临床疗效与治疗前后CD28，CD137表达及T淋巴细胞亚群　(略) 3讨论 肿瘤细胞不能激发有显著意义的，由T细胞介导的特异性抗瘤反应即逃避宿主免疫监视的重要原因在于：①缺乏强免疫原性的特异性肿瘤抗原；②MHC分子表达不足或缺陷；③共刺激分子表达不足或缺陷；④T细胞免疫功能低下或缺陷；⑤其他因素（如细胞因子水平异常、异常抑制物等）［9］. 近年来，共刺激分子的抗瘤作用引起了众多学者的广泛重视. 研究表明，CD28与B71和CD137（41BB）与CD137L是两对最重要的共刺激分子，前者表达于静止T细胞，优先诱导CD4+T细胞活性，而后者表达于活化T细胞,优先诱导CD8+T细胞活性，可见它们在介导免疫反应的过程