钙网蛋白在不同疼痛模型大鼠脊髓中的表达.doc

钙网蛋白在不同疼痛模型大鼠脊髓中的表达 作者：王金韬 罗爱林 金小高 张广雄 罗辉宇 【摘要】 目的： 观察钙网蛋白在三种疼痛模型大鼠的脊髓中表达的变化，探讨其与疼痛的可能关系. 方法： 分别制作甲醛炎性痛模型、保留性坐骨神经分支损伤（SNI）模型和慢性缩窄性坐骨神经损伤（CCI）模型，观察大鼠疼痛行为学改变，并分别用免疫组化和Western Blot技术检测大鼠脊髓cFos和钙网蛋白的表达. 结果： 与对照组相比，各模型组大鼠脊髓后角cFos 阳性神经元增多(Plt;0.05)； SNI模型组和CCI模型组大鼠脊髓钙网蛋白的表达均上调(Plt;0.05)，甲醛炎性模型组大鼠脊髓钙网蛋白变化无统计学意义(Pgt;0.05). 结论： 脊髓钙网蛋白的表达上调与SNI和CCI模型的慢性神经病理痛发生过程有关. 【关键词】 疼痛；脊髓；钙网蛋白 　　【Abstract】 AIM: To detect the change of rat spinal calreticulin expression levels in three pain models and to investigate the possible involvement of calreticulin in pain development. METHODS: Formalin inflammatory pain model, spared never injury(SNI) model, and chronic constriction injury(CI) model were established. Then, the behavioral changes were observed and evaluated and cFos and calreticulin expressions in the spinal cord of rats were detected with immunohistochemistry and Western Blot, respectively. RESULTS: Compared with control groups, quantity of cFos positive neurons significantly increased in spinal dorsal horn of rats with formalin injection, SNI or CCI (Plt;0.05); calreticulin expression levels were upregulated significantly in spinal cord of rats with SNI and CCI (Plt;0.05), but not in spinal cord of rats with formalin injection (Pgt;0.05). CONCLUSION: Upregulation of calreticulin expression in spinal cord is involved in the development of chronic neuropathic pain induced by SNI and CCI. 　　【Keywords】 pain; spinal cord; calreticulin 　　0引言 　　钙网蛋白(calreticulin， CRT)是一种在动物和高等植物体内普遍存在，主要分布于内质网腔内，有很强的钙结合能力的钙结合蛋白，具有多种重要生理功能. 钙网蛋白通过调节细胞内钙稳态和相关信号转导途径，影响细胞内基因表达、蛋白质合成和翻译后修饰等等，在神经系统的多种生理、病理过程中发挥重要作用［1-2］. 然而，国内外研究均缺乏钙网蛋白与疼痛是否有关的直接实验证据，因此本研究拟通过观察钙网蛋白在三种疼痛模型大鼠脊髓中表达的变化探讨其与疼痛的可能关系. 　　1材料和方法 　　1.1材料体质量200～250 g的雄性SD大鼠30只，由华中科技大学同济医学院动物实验中心提供. 实验前在同一环境(室温20～24℃，避免强光及噪声刺激，自由进食和饮水)饲养48 h以上. 足底触觉测量仪(37400型)为意大利Ugo Basile公司产品. 兔抗钙网蛋白抗体(Stressgen，SPA600D)购自晶美公司，鼠抗βactin抗体(BM0627)，兔抗cFos抗体(BA0207)为武汉博士德产品，SABC试剂盒(SP9001)，HRP标记二抗(za2301, zb2305)均购自北京中山公司. 　　1.2方法 　　1.2.1分组大鼠随机分为5组，每