外燥对小鼠气管细胞凋亡与bcl2基因及bax基因表达的影响.docVIP

外燥对小鼠气管细胞凋亡与bcl2基因及bax基因表达的影响 目录 TOC \o 1-9 \h \z \u 目录 1 正文 1 文1：外燥对小鼠气管细胞凋亡与bcl2基因及bax基因表达的影响 1 1 材料与方法 2 2 结果 4 3 讨论 4 文2：明志胶囊对老年痴呆大鼠学习记忆及脑皮质Bcl2和Bax基因表达的影响 6 1 材料和方法 7 2 结果 9 3 讨论 10 参考文摘引言： 11 原创性声明（模板） 12 文章致谢（模板） 13 正文 外燥对小鼠气管细胞凋亡与bcl2基因及bax基因表达的影响 文1：外燥对小鼠气管细胞凋亡与bcl2基因及bax基因表达的影响 Abstract：ObjectiveTo investigate apoptosis and expression of bcl-2 gene,bax gene in respiratory intraepithelium of mice with kunming mice were divided into three groups, including group A(normal mice),group B(warm-dry mice),group C(cool-dry mice)，10 mice/group. Expression of bcl-2 gene,bax gene and apoptosis were measured on the 14th was no significant difference for apoptosis among the three groups. Bcl-2 PI and AI in group B and C were markedly reduced compared with group A(P),and bax gene increased in the ratio of bcl-2:bax can decrease the expression of bcl-2 gene, change the ratio of bcl-2:bax protein. Key words：Outer-Dry; Bcl-2 gene; Bax gene; Apoptosis 细胞凋亡是细胞接受某种信号后的一种由基因控制维持组织细胞动力学平衡的生理性死亡过程。bcl-2基因、bax基因在疾病机制研究中倍受关注，细胞增殖与凋亡平衡的实质可能是中医阴阳在细胞水平上的表现［1］，分子生物学理论与技术成为探析中医病因病机的新方法之一 。近年来从气象因素、生物致病因子和机体反应性等研究六淫中风、寒、湿、火（热）等病邪,有的已达分子水平［2］，但对燥邪病因病机研究较为滞后。课题组的相关研究结果显示，外燥致小鼠气道分泌功能障碍、气管上皮鳞状化生与炎性细胞浸润等病变。本文研究外燥对小鼠气管细胞凋亡与bcl-2基因、bax基因表达的影响，为外燥分子致病机制积累资料。 1 材料与方法 动物 昆明种小鼠（SPF级）30只，体重(18±1) g，雌雄各半，湖北省实验动物研究中心提供，许可证号：SCXK（鄂）2003-2005。 仪器与试剂 人工智能气候箱（LRH-250，温度：(30~65±1)℃，相对湿度：(30%~90%)±5%，广东医疗器械厂，LG风扇程控仪（MASTER-K30H,韩国），光学显微镜（Laica,德国），图像分析系统（HPISA-1000,华中科技大学同济医学院提供）。TUNEL试剂盒（编号：MK1020）、bcl-2羊抗鼠IgG多抗（编号：BA0412，2005-03）、bax羊抗鼠IgG多抗（BA0315，2005-03）、二氨基联苯胺（ED1022，2005-03）、即用型SABC免疫组化染色试剂盒（SA1022，2005-03）、以及各阳性对照片购自武汉博士德生物工程有限公司。 方法 分组与造模30只昆明种小鼠随机分为3组，即常温常湿组、温燥组与凉燥组，每组10只，置人工气候箱内、用昆明种小鼠饲料常规饲养，按表1模拟外燥“温度－相对湿度－风”综合条件刺激进行造模。 气管细胞凋亡检测用脱氧核糖核酸末端转移酶介导的缺口末端标记法（TUNEL）［3］。各组小鼠在实验前4 h禁食、禁水。主要步骤：第14天断颈处死小鼠，从喉头至气管分叉处剪取气管，标本经100 g/L中性甲醛固定，常规脱水包埋，4 μm厚连续切片；3%H2O2甲醇37℃阻断10 min， mol/L pH 柠檬酸缓冲液微波加热至95℃，加核苷酸/核苷酸转移酶混合液37℃，1 h，转换POD 37℃，30 min，DAB显色，苏木素复染。结果判断：光镜观察气管上皮细胞核内之棕黄色