响应面法优化微波辅助葛根素高效液相色谱课稿.doc

响应面法优化微波协助葛根素的高效液相色谱课稿 响应面法优化微波协助葛根素的高效液相色谱课稿 PAGE / NUMPAGES 响应面法优化微波协助葛根素的高效液相色谱课稿 对粉葛中葛根素和大豆苷元的 HPLC荧光法测定的微波协助提取工艺的响应面优化 纲要：微波协助提取法是对粉葛中葛根素和丹参素的 HPLC荧光检测响应面法优化。优化的提取过程经过浸泡样品用 70%甲醇达到（ 1∶15， v／ v）为 30 分钟，而后微波照耀 11 分钟，在 600 W耦适用 HPLC荧光提出恢复优秀，令人满意的精度的提取工艺，功率，和优秀的线性关系。从中国药典方法对比，该方法使高提取效率和更正确的剖析结果。它能够在粉葛药材质量评论的潜伏价值。 重点词：微波协助萃取（ MAE）；响应面法（ RSM）；葛根素；丹参素；高效液相色谱 - 荧光检测；粉葛 前言 粉葛是粉葛的干燥根。（豆科），多年生豆科植物主要散布在亚洲东部。它 是一个重要的中药用于治疗肩、腕的刚度，感冒，流感，高血压，等 [ 1 ] 葛根素和大豆苷元（图 1）是两种主要异黄酮粉葛。药理和临床研究表示，葛根素可用于治疗高血压，心绞痛，急性心肌堵塞 [ 2 ] ；和大豆苷元对脑缺血缺氧的影响， [ 3 ] 和[ 4 ] 心血管疾病。从药物的需求增添行业已致使大规模提取葛根素和大豆苷元的粉葛。所以有必需成立一个高效、低成本的提取及含量测定 已作出了很多试试来测定粉葛中葛根素及其制剂，如紫外线分光光度法 （ UV）[ 6 ] ，高效液相色谱 - 紫外检测（ HPLC-UV）[ 7 ] 和液相色谱 / 串连质谱（ LC-MS）[ 10 ] 。分别纯化葛根高速逆流色谱异黄酮也已发展 [ 11 ] 。葛根或其药用制剂葛根素等生物活性成分的测定向来试牟利用毛细管区带电泳紫外检 测 [12,13] ，近红外光谱（ NIRS）[ 14 ] 和 HPLC-UV[15,16]。用 HPLC荧光检测葛根素提升了测定敏捷度 [17,18] 图葛根素和丹参素的程序构造 葛根异黄酮一定 extractedf ROM 粉葛在高效液相色谱剖析。传统 lextraction 技术如热回流，醇渗漉和浸渍 [19,20] 拥有较低的提取效率高，有机溶剂比。一 些新的技术，如超临界流体，超声和微波炉已被用于提取葛根异黄酮 [ 21]。微 波协助提取法（MAE）在植物中的植物活性化合物的剖析产生了宽泛的兴趣 [ 26]。 响应面法（ RSM）是一个采集的统计和数学技术的发展，提升，优化过程 [ 27]。 它能够辨别和量化的各样不一样的参数之间的互相作用。 Box-Behnken 设计是一个 RSM用于检查的关系一个或多个响应变量和一组实验参数之间的定量方法 [ 28 ] 。它有较少的设计重点和较少的实验进行的二次模型。别的，每个要素三水平而需要五为中心复合设计要求 （除非 α 等于一），这是实验中心复合设计和比同样数目的要素 [ 29 ] 更方便和廉价的任务本研究的目的是优化响应面法从粉葛的生物活性化合物的微波协助提取法， 并同时测定葛根素和大豆苷元提取物中 的高效液相色谱 - 荧光检测法（ HPLC-FD）。本研究展开的这样一个过程的第一次 个实验 2.1 资料和化学品 粉葛的商业植物样品， 在广西，中国生产的，是来自西安的毒品市场购置 （中国）。它是由易博士任认证 （药用植物质源教育部重点实验室和天然药物化学教授， 陕西师范大学，西安，中国） 。葛根素和大豆苷元的标准化合物从国家为控制所得 到的药品和生物制品（北京，中国） 。甲醇和乙腈（色谱级）获取了霍尼韦尔国 际企业（马斯基根，毫升， USA）。与微孔 Milli-Q 系统制备了超纯水（ Bedford ，MA，USA） 2.2 高效液相色谱剖析 高效液相色谱法剖析了一个水域的细风的液相色谱系统（沃特世企业，米 尔福德， MA，USA）。这包含水域 1525 二元高压泵和控制的恒温柱室受权工作组。 Waters 2996 二极管阵列探测器记录的剖析物的汲取光谱。一个水域 2475 多波 长荧光检测器进行定量检测。分别在 Agilent hc-c18 柱（ 250 mmx4.6 mm）中进 行。乙腈（ A）和 KH2PO4三乙胺缓冲溶液（ ph7.5,0.01 m）（ B）为流动相梯度洗 脱程序，分别洗脱 0 - 25min，25～ 30 min，。流动相的流速为 0.8mL/min 。注入量为 10 mm，柱的温度保持在 30℃。汲取光谱记录从 220 nm 到 400 nm。荧光激发和发射波长分别为 350 nm 和 472 nm。 2.3 标准溶液的制备 五毫克的葛根素和大豆苷元一毫克被精准称量并布置在一个 5 毫升体积瓶中。用 70%甲醇溶液制备溶液 1000 mg／