基因表达调控.ppt

生理性诱导剂 实验常用诱导剂 别位乳糖 异丙基硫代半乳糖（IPTG） Lac操纵子诱导剂 第三十一页，共72页 mRNA 阻遏蛋白 I DNA Z Y A O P pol 没有乳糖存在时 2、阻遏蛋白的负性调节 阻遏基因 与操纵序列结合，RNA 聚合酶则不起作用，不转录 第三十二页，共72页 mRNA 阻遏蛋白 有乳糖存在时 I DNA Z Y A O P pol 启动转录 mRNA 乳糖 别乳糖 β-半乳糖苷酶 第三十三页，共72页 + + + + 转录 无葡萄糖，cAMP浓度高时 有葡萄糖，cAMP浓度低时 3、cAMP-CAP的正性调节 Z Y A O P DNA CAP CAP CAP CAP CAP CAP 第三十四页，共72页 cAMP:环一磷酸腺苷 CAP：分解代谢基因激活蛋白质 (catabolite gene activator protein，CAP) cAMP与葡萄糖相关性：葡萄糖↑，cAMP↓ 葡萄糖↓，cAMP↑ CAP的活性依赖cAMP， 形成cAMP-CAP复合 物，促进多种操纵子的转录起始。 第三十五页，共72页 葡萄糖存在时： 优先利用葡萄糖作为能源。 与阻遏蛋白的存在有关 --乳糖操纵子的负调控 与cAMP有关： 葡萄糖 cAMP Lac操纵子（-） 只有乳糖存在时： 只能利用乳糖 解除阻遏蛋白的作用 CAP-cAMP复合物的激活作用 CAP+cAMP 乳糖操纵子 导致结构基因转录(正调控) cAMP 在原核生物中的作用 （饥饿信号） CAP(分解物基因激活物蛋白): 有二个相同亚基的蛋白质 一个与DNA结合的domain 一个与cAMP结合的domain 第三十六页，共72页 ※当阻遏蛋白封闭转录时，CAP对该系统不能发挥作用； ※如无CAP存在，即使没有阻遏蛋白与操纵序列结合，操纵子仍无转录活性。 第三十七页，共72页 原核生物基因表达的一般情况 （乳糖操纵子） 环境条件的变化是相关基因表达的外界信号 基因表达的负调控 基因表达的正调控 正、负调控协同表达 葡萄糖、乳糖浓度的变化 Lac阻遏物与操纵基因 cAMP+CAP与相应的DNA序列 第三十八页，共72页 （二）转录终止的调控 原核生物的转录终止调控方式分两大类：A.依赖ρ因子的终止调控；B.不依赖ρ因子的终止调控。此外，核糖体也参与转录终止。 例:色氨酸操纵子表达的调控有两种方式: a.通过阻遏蛋白的负调控 b.通过衰减子作用 第三十九页，共72页 Trp Trp 高时 Trp 低时 mRNA O P trpR 调节区 结构基因 RNA聚合酶 RNA聚合酶 转录衰减的调控 色氨酸操纵子 6700个核苷酸 140个核苷酸 ? 第四十页，共72页 UUUU…… UUUU…… 调节区 结构基因 trpR O P 前导序列 衰减子区域 UUUU…… 前导mRNA 1 2 3 4 衰减子结构 第10、11密码子为trp密码子 终止密码子 14aa前导肽编码区: 包含序列1 形成发夹结构能力: 序列1/2序列2/3序列3/4 trp 密码子 UUUU…… 衰减子：是一种位于结构基因上游前导区的终止子。 第四十一页，共72页 引导序列由一段14氨基酸前导肽编码区和一个衰减子组成，AUG密码子后面紧跟13个密码子，第10、11为色氨酸密码子。 色氨酸操纵子mRNA引导序列不同区域互补所形成的不同二级结构 第四十二页，共72页 UUUU…… 3 4 UUUU 3’ 3 4 核糖体 前导肽 前导mRNA 1.当色氨酸浓度高时 转录衰减机制 1 2 5’ trp 密码子 衰减子结构 就是终止子 可使转录 前导DNA UUUU 3’ RNA聚合酶 终止 第四十三页，共72页 UUUU…… 3 4 2 4 2 3 UUUU…… 核糖体 前导肽 前导mRNA 1 5’ trp 密码子 结构基因 前导DNA RNA聚合酶 2.当色氨酸浓度低时 Trp合成酶系相关 结构基因被转录 序列3、4不能形成衰减子结构 第四十四页，共72页 色氨酸操纵子的转录衰减作用 色氨酸丰富时，核蛋白体顺利沿引导序列移动直达最后一个密码子UGA，合成完整的引导肽。RNA聚合酶停止在衰减子部位。 色氨酸缺乏时，核蛋白体终止在1区Trp密码子部位，RNA聚合酶通过衰减子而继续转录。 第四十五页，共72页 (三) 翻译水平的调控 翻译一般在起始和终止阶段受到调