基因诊断与基因治疗 (3).ppt

* (四) 基因测序 即，DNA碱基序列分析，这是最确切、最直接的基因诊断方法。 目前常用的方法为Maxam-Gilbert建立的化学裂解法和Sanger建立的双脱氧末端终止法。 第三十一页，共61页 * 四. 基因诊断的临床应用 (一) 遗传病的基因诊断 (二) 肿瘤的基因诊断 (三) 感染性疾病的基因诊断 第三十二页，共61页 * 举例： ——镰刀状红细胞贫血 β－珠蛋白基因的第六个密码子A→T ↓ 表达产物：谷氨酸→缬氨酸 一个碱基突变→缺失1个MstⅡ内切酶位点 正常人： 1.1kb 患者： 1.3kb 第三十三页，共61页 * 5’ 3’ 5’ 3’ 1.1 kb 1.3kb Mst II酶切位点（CCTNATG） 正常基因 突变基因 1.3kb 1.1kb 0.2kb 1 2 3 1、正常人 2、突变携带者 3、患者 第三十四页，共61页 * 第二节 基因治疗 基因治疗的概念 基因治疗的总体策略 基因治疗的基本程序 基因治疗的现状与展望 第三十五页，共61页 * 一、基因治疗概念 狭义概念 将具有正常功能的基因置换或增补患者体内有缺陷的基因，从而达到治疗疾病的目的。 广义概念 将某种遗传物质转移到患者细胞内，使其在体内发挥作用，最终达到治疗疾病的目的。 第三十六页，共61页 * 二、基因治疗的总体策略 基因矫正 基因置换 基因增补 基因失活 “自杀基因”的应用 免疫基因治疗 耐药基因治疗 第三十七页，共61页 * （一）基因矫正（gene correction） 对于致病基因中的异常碱基进行精确修复，使其恢复正常功能； （二）基因置换（gene replacement） 用正常基因在原位替换致病基因，使细胞DNA完全恢复正常状态； 第三十八页，共61页 * （三）基因增补（gene augmentation） 将正常基因导入患者体细胞内，使其整合到染色体中一起表达，以补偿缺陷基因的功能 ，但致病基因未去除。 （四）基因失活（gene inactivation）： 指将特定的反义核酸导入细胞，通过碱基互补作用与mRNA结合，阻断肿瘤细胞中基因的异常表达，以抗肿瘤、抗病毒。 反义RNA: 干扰mRNA的互补RNA; 反义DNA: 干扰DNA的互补DNA. 第三十九页，共61页 * （五）“自杀基因”的应用 自杀基因 这种基因导入受体细胞后可产生一种酶，它可将 原无细胞毒性或低毒药物前体转化为细胞毒物质，将 细胞受体细胞杀死，这种基因被称为“自杀基因”。 自杀基因导入肿瘤细胞后，可将肿瘤细胞杀死。 但对正常细胞则无伤害作用。 第四十页，共61页 * （六）免疫基因治疗 将某些细胞因子（IL-2、GM-CSF等）基因导入肿瘤患者体内，以增强患者的抵抗力。 （七）耐药基因治疗 在肿瘤化疗过程中， 把产生抗药物毒性的基因导入患者体内，从而使患者能耐受更大剂量的化疗。 第四十一页，共61页 * 三、 基因治疗的基本程序 （一）治疗性基因的获得 在了解疾病发生的分子机制基础上， 选择对疾病有治疗