基因表达调控 (3).ppt

CAP 的结合位点 CAP：catabolite gene activation protein CAP的结合位点在 -60 处。 CAP以同源二聚物的形式与 cAMP 结合，这个复合物结合在 CAP结合位点上。 外环境中葡萄糖的减少可以增加cAMP 合成。 第三十页，共86页 （三）乳糖操纵子的高效表达需要另外的正调控方式 葡萄糖效应：培养基中有葡萄糖存在时，即使有乳糖存在，不诱导靶基因表达。这样的操纵子称葡萄糖敏感操纵子。这种效应由一种正控制机制决定。 葡萄糖抑制操纵子的原理：　葡萄糖 →腺苷酸环化酶活性降低 → ATP无法转变成cAMP → 不能形成CAP-cAMP复合蛋白→ RNA酶无法结合在DNA上 → 结构基因不表达。 第三十一页，共86页 乳糖操纵子的协同调控 第三十二页，共86页 乳糖操纵子的意义 阻遏蛋白的抑制作用和CAP介导的正调控共同担负着原核生物体系内糖源的协调利用。 乳糖操纵子的协调调控方式保证了葡萄糖是原核生物体系优先利用的碳源，并只有在葡萄糖完全耗尽后，原核生物才利用乳糖作为碳源。 第三十三页，共86页 trp operon 第三十四页，共86页 二、翻译水平调控是对转录调控的补充 （一）转录与翻译的偶联调控提高了基因表达调控的有效性 trp operon的有效关闭还有一种属于促进已经开始转录的mRNA合成终止的方式来进一步加强，称为转录衰减。 第三十五页，共86页 色氨酸操纵子（trp operon） 结构基因：trpE、trpD、trpC、trpB 和 trpA 上游调控区：调节基因（trpR）、启动子（P）和操纵序列（O）。 启动子（P）和操纵序列（O）有部分重叠。 第三十六页，共86页 开放状态的色氨酸操纵子 当培养基中色氨酸含量很少时，trpR 阻遏蛋白以同源二聚体的形式存在，不能与操纵序列 O 结合，使得RNA聚合酶能够启动转录。 第三十七页，共86页 关闭状态的色氨酸操纵子 当色氨酸含量丰富时，色氨酸与色氨酸阻遏蛋白结合，使其能够与操纵序列结合，抑制转录。色氨酸被称为辅阻遏剂（corepressor）。 第三十八页，共86页 色氨酸操纵子 mRNA 前导序列 第三十九页，共86页 前导序列L的结构特点： ①可转录生成一段长为162bp、内含4个特殊序列的前导mRNA ②其中序列1有独立的起始和终止密码，可翻译成为一个有14个氨基酸残基的前导肽 ③序列1和序列2间、序列2和序列3间、序列3和序列4间存在一些互补序列，分别都可以形成发夹结构 ④序列4下游有一个连续U序列，是一个不依赖ρ因子的转录终止信号 第四十页，共86页 UUUU…… UUUU…… 调节区 结构基因 trpR O P 前导序列 衰减子区域 UUUU…… 前导mRNA 1 2 3 4 衰减子结构 第10、11密码子为trp密码子 终止密码子 14aa前导肽编码区: 包含序列1 形成发夹结构能力强弱： 序列1/2序列2/3序列3/4 trp 密码子 UUUU…… 第四十一页，共86页 转录中的色氨酸操纵子 当色氨酸的浓度降低时，核蛋白体在合成前导肽的两个色氨酸部位上出现暂停，占据了序列1。而此时的转录仍在进行，序列2和序列3形成了稳定的2:3茎-环结构。RNA聚合酶可以转录5个结构基因。 第四十二页，共86页 转录衰减子终止了转录 当色氨酸含量丰富时，有足够的色氨酸用于合成前导肽。核蛋白体可顺利通过序列1，并继续向前与序列2结合。核蛋白体与序列1和序列2的结合，使序列3和序列4形成了3:4茎-环结构。这一结构与随后的多聚U序列使RNA聚合酶终止了转录。 第四十三页，共86页 第四十四页，共86页 衰减子（attenuator） 前导序列起到了随trp浓度升高而降低转录的作用，故将操纵子前导区内一段类似于终止子结构的DNA序列称为衰减子，其作用是减弱操纵子的转录，实现对转录过程的精确调节。在trp操纵子中，阻遏蛋白对结构基因转录的负调控起到粗调作用，而衰减子起到精调的作用。 第四十五页，共86页 （二）SD序列影响翻译起始速度 （三）翻译阻遏利用蛋白质与自身mRNA的结合实现翻译起始的调控 （四）mRNA密码子的编码频率影响翻译的延伸速度 第四十六页，共86页 第三节 真核生物的基因表达调控 第四十七页，共86页 真核生物的基因表达调控比原核生物复杂得多： 真核基因组比原核基因组大得多 真核基因组只有10%的编码序列，其余序列功能尚不清楚 真核生物编码蛋白质的基因不连续 真核生物是单顺反子结构 真核生物DNA在细胞核内与多种蛋白质结合构成染色质，这种复杂结构直接影响着基因表达 真核生物