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低温下血小板生理学性质的研究进展 目录 TOC \o 1-9 \h \z \u 目录 1 正文 1 文1：低温下血小板生理学性质的研究进展 1 1 钙离子及肌动蛋白上调 2 2 血小板膜侧向分离 3 3 GPIbα的簇状聚集 3 4 血小板内代谢活性增强致乳酸增加及pH下降 5 5 血小板膜磷酸酪氨酸磷酸酶（PTP）活性减弱 5 文2：肠道微生态的生理学研究进展 6 1 肠道微生态和组织结构发育 6 2 肠道微生态和机体新陈代谢 6 3 肠道微生态和肠脑轴 7 4 肠道微生态和内分泌 8 5 肠道微生态和免疫系统 8 6 小结 8 参考文摘引言： 9 原创性声明（模板） 9 文章致谢（模板） 10 正文 低温下血小板生理学性质的研究进展 文1：低温下血小板生理学性质的研究进展 目前，许多血液病都需要在患者体内输入血小板来达到 治疗 目的，但是，血小板保存技术的不足，使之不能适应临床需求。如:液态4℃低温保存的血小板容易被激活，输入体内后很快被清出血流，使其止血功能明显下降。而22℃常温振荡保存易使血小板遭受细菌污染，污染几率是低温保存的50倍，输入体内后会造成机体脓毒性休克，并且储存时间仅限于5d。深低温保存及低温干燥保存虽然可以克服上述缺点，但血小板深低温保存的保护剂二甲基亚砜（DMSO）对受者有毒副作用，在洗涤去除DMSO的过程中，血小板易被激活、损伤，丧失临床应用价值。低温干燥保存会导致血小板膜发生侧向分离、聚集，从而使血小板容易被激活［1］ 。近年来，随着对低温诱导血小板活化及低温保存的血小板在体内清除机制研究的不断深入，血小板4℃液态保存技术取得了突破性进展。研究表明，血小板低温保存后易被活化及在体内被快速清除的主要原因是血小板的生理学性质发生了改变，主要包括以下几方面。 1 钙离子及肌动蛋白上调 血小板对温度十分敏感，当它们置于低温下时，形态会从正常的铁饼状变成圆球状，周边形成许多伪足，同时伴有血小板胞质内的钙离子明显增加、微管解聚。Oliver等［2］ 将温度以℃#12539;min -1 的速度从20℃降至5℃，以钙敏感性荧光探针（）探测人体血小板内钙浓度的变化，发现随着温度逐渐降低，血小板内钙离子明显增加，多数钙来源于微管中钙的释放。鬼笔环肽（phalloidin）可以与肌动蛋白结合，Tablin等［1］ 用荧光标记的鬼笔环肽探测肌动蛋白，发现血小板4℃低温保存1h后，肌动蛋白增加5倍以上。此外，血小板4℃低温保存24h以上会出现α.颗粒的聚集和释放，类似于血小板正常生理激活过程，之后血小板几乎失去活性。研究证明，低温下血小板形态的改变是由胞质内钙离子迅速增加，使血小板骨架肌动蛋白集结装配所造成的，血小板形态发生变化后易被激活。Reid等［3］ 发现，在血小板中加入钙离子螯合剂EGTA及细胞松弛素B后低温保存，血小板形态始终保持正常的铁饼状。 2 血小板膜侧向分离 Tablin等［1］ 发现，低温下血小板膜发生脂相转移及脂质成分侧向分离，这与胞质内钙离子迅速增加及骨架肌动蛋白的集结装配有关。膜脂质成分发生侧向分离可形成许多小的集团，这些集团由一些排列整齐的膜蛋白组成。研究者将这些小的集团分离出来后发现，其中包含有血小板凝血酶蛋白受体CD36及非受体类酪氨酸激酶类src、lyn、fyn，表明这些集团在细胞信号通路中起着一定作用，并且通常是使血小板激活的信号通路，在没有凝血酶存在的情况下可使血小板发生异常激活［1，4，5］ 。 从地球两极鱼类体内提取的抗冻糖蛋白是一种血小板低温保存的保护剂，它可使血小板低温保存21d以上。抗冻糖蛋白是通过抑制血小板膜侧向分离来达到保护目的的。其缺点是将血小板输入患者体内前，需充分洗涤去除抗冻糖蛋白，这一过程易造成血小板损伤，使其失去临床应用价值，并且抗冻糖蛋白不易获得，也限制了它的临床应用。海藻糖是一种非还原性双糖，不仅可以防止低温所致的血小板侧向分离，还对生物大分子具有干燥保护作用，是一种很有潜力的血小板低温保存保护剂［1］ 。 3 GPIbα的簇状聚集 有学者发现，低温保存的血小板回输体内后能够被肝脏巨噬细胞所吞噬，从而很快被清除出血流，最初认为是由低温造成的血小板形状改变所致。但Hoffmeister等［6］ 发现，在血小板中加入钙离子螯合剂EGTA及细胞松弛素B后，尽管能够使血小板保持正常的铁饼状，但血小板仍被快速清出血流［7］ ，于是研究者们推断是其他原因造成了血小板快速清除、寿命缩短。 血小板粘附受体由GPIbα、GPIbβ、GPIX和GPV4种跨膜亚单位构成，它们的结合比例为2∶2∶2∶1。GPIbα胞外氨基末端区域为配体结合部位，胞内区域与肌丝蛋白A、B结合，