《发酵工程》03 工业用培养基制备.pptVIP

一、培养基的类型  分类依据 类型 纯度 天然、合成、半合成 培养基物理状态 液体、固体、半液体 培养基的成分和目的 基本、完全、鉴别、选择 生产工艺的要求 孢子(Spore)、种子、发酵 孢子(Spore)培养基： 固体； 营养不太丰富（尤其是有机氮源）； 适当的无机盐浓度； 适当的pH和湿度 种子培养基： 液体； 营养全面，稀薄为好 最后一级尽量接近发酵培养基。 发酵培养基： 液体； 营养丰富，完全； C、N源速、缓搭配； 应注意C:N、pH、生长因子、前体等。 （一）培养基的设计原则 何菌种？何产物？是固态还是液态？是种子还是发 酵培养基？ 各种营养物质的浓度与配比，特别是C/N 将培养基的pH控制在一定范围内 考虑利用价廉且易于获得的原料 废代好、粗代精、野代家、 烃代粮、纤代糖、国代进、简代繁 1. 文献资料，个性发酵 2. 单因子试验法 3. 正交试验法 ?4. 中小试发酵规模进一步优化配方 工业上常出现菌体代谢异常从而引起产量大幅度波动，产生的原因很多，主要有： 一、 原材料质量的影响 生产上要求原材料定点，如琼脂，海燕牌。其它如大豆，玉米粉等。由于来源广，加工方法不同，质量不稳定。由于发酵过程影响因素太多，分析原因时一定要排除原材料。碳源影响要小一些。工业葡萄糖，多是淀粉糖，淀粉水解的方法有:酶法，和酸法。由于酸水解需加145℃，糖容易产生5—甲基糠醛→有色物质，为什么葡萄糖灭菌需用110℃ 30分钟， 糠醛对微生物代谢有毒副作用。 二、 水质的影响 水质对许多产品的生产有较大的影响。有硬水，软水：含Ca、Mg。柠檬酸生产水质对孢子产生有影响。 三、灭菌的影响 高温短时灭菌的原理，细菌被杀死而维生素糖破坏较少。工业上葡萄糖要分开灭菌。如青霉素生产，葡萄糖灭菌分开，产量提高10% 。 强调包括“生长“与“代谢“这两方面。 0.294MPa下20min,0.343MPa下７—10min. 高压：普通灭菌锅的压力才为0.15MPa 高温：超过100度，一般为130-140度 可见，前体物质的结构往往比较简单，因此可以走结合线路（先用化学方法合成廉价前体，在用发酵法生产高值产品） 增强细胞的渗透性，使营养物质容易被利用，代谢产物易于排出，加强氧的传递速度， 一般来说，促进剂是高度专一性的，往往不能互相套用。 前体物质是消耗性的，而促进剂与抑制剂则不是。 详细解释鉴别培养基与选择培养基 筛选培养基：如选择（鉴别）培养基 保藏培养基：基本培养基 检验杂菌：加富培养基 发酵工艺一般流程 种子扩大培养 培养基配制与灭菌 空气除菌 发酵工艺过程检测与控制 菌种选育 培养基(Culture medium) 人工配制的供微生物或动植物细胞 生长、繁殖、代谢和合成人们所需 产物的营养物质和原料 。 蛋白质和氨基酸在碳源贫乏时可作为碳源。 作用 提供能源， 构成细胞碳架， 代谢产物 常用碳源 糖类、 油脂、 有机酸、 低碳醇、 碳氢化合物 糖类 单糖：葡萄糖，速效碳 双糖：蔗糖、乳糖和麦芽糖 多糖：糊精、淀粉及其水解液（水解为单糖 或二糖才能用） 过多可产酸，pH降低 油脂 一般霉菌和放线菌可以用油脂作碳源。 发酵过程中加入的油脂有消沫和补充碳源的双重作用。 利用油脂作碳源时耗氧量增加，必须提供充分的氧气 过多可导致有机酸积累，pH降低 油脂在贮藏过程中易氧化产生过氧化物，有毒副作用 有机酸、醇、碳氢化合物 有些菌可用 有机酸盐对发酵pH值起调节作用 生理碱性（Basic）物质 CH3COONa十2O2 →CO2十H2O十NaOH 速效碳与缓效碳 速效碳：一般指葡萄糖，利于生长 缓效碳：二糖、多糖等，利用生产 配合使用 工业发酵用多糖一般都要经菌体产生的胞外酶水解成单糖 1.作用： 供菌体结构物质，能源（少），含氮代谢产物。 2.类型： （1）有机氮源 豆饼粉、花生饼粉、棉子饼粉、酵母粉、 麦麸、鱼粉、玉米浆、蛋白胨、尿素等 有机氮特点： 成分复杂，有利于生产和产物合成。 （2）无机氮源类型：氨水、铵盐、硝酸盐 无机氮特点