以斑马鱼为模型的纳米壳聚糖安全性评价研究.docVIP

PAGE PAGE 22 以斑马鱼为模型的纳米壳聚糖安全性评价研究 摘要：采用以斑马鱼为模型的纳米壳聚糖安全性评价研究，以了解纳米壳聚糖对生物体的安全性。以普通壳聚糖作为参照，通过测定LC50（96 hpf和120 hpf）、TC50（120 hpf）、孵化率、体重、体长和心率等指标，评价纳米壳聚糖的胚胎毒性。结果显示纳米壳聚糖对斑马鱼胚胎的LC50（96 hpf 和120 hpf）均低于普通壳聚糖，并且在120 hpf 下胚胎的TC50 也明显低于壳聚糖；两种物质都使斑马鱼胚胎的孵化率产生延迟现象；两种物质对斑马鱼心率、体长和体重的影响较小。可见本实验所用纳米壳聚糖比普通壳聚糖安全性更好。同时将斑马鱼幼鱼暴露在不同浓度的纳米壳聚糖溶液中进行行为试验，研究了纳米壳聚糖对斑马鱼幼鱼神经方面的影响，得出在高浓度下，纳米壳聚糖会使斑马鱼环境适应能力下降。 关键词：斑马鱼模型；纳米壳聚糖；安全性评价。 SAFETY EVALUATION OF CHITOSAN NANOPARTICLES IN ZEBRAFISH MODELS Abstract:This project acuted the toxicity of chitosan nanoparticles by zebrafish model to evaluate the safety of nano-chitosan in vivo. Using normal chitosan as reference, measuring the values of LC50 at 96hpf and 120 hpf, TC50 at 120 hpf, hatching rate, body weight, body length and heart rate and other indicators of zebrafish embryos to evaluate the safety of nano-chitosan. From the results we can infer that nano-chitosan is safer than the normal.In order to study the neurological effects of chitosan nanoparticleson on zebrafish larvae, I examined the behavior of zebrafish larvae . The result of vitality test shows that high concentration of nano-paticles can cause adaptability decline in zebrafish. * Keywords: zebrafish models; chitosan nanoparticles; safety evaluation. 正文目录 1 引言 壳聚糖（chitosan)是由甲壳素经脱乙酰基反应后所得到的多聚糖。自然界中，壳聚糖广泛存在于接合菌的细胞壁、酵母和原生动物、小球藻、昆虫表皮，特别是存在于甲壳类动物的外骨骼中。1811年，法国科学家Henri Braconnot在蘑菇中发现甲壳素。1820年，从昆虫表皮提取出甲壳素。1859年，Rouget报告称把壳聚糖在氢氧化钾溶液中煮沸可以得到壳聚糖。1894年，Hoppe-Seyler将它命名为壳聚糖。因为壳聚糖具有很多独特的理化和生物性质，所以上世纪90年代的欧美医学界和营养学界曾将其称之为“第六生命要素”[1]，是一种来源丰富、无毒害、生物相容性好、可降解的天然高分子材料。壳聚糖具有很多重要的生理功能，如抑制细菌活性[2]、抗肿瘤和抗癌[3]、降低人体胆固醇[4]、增强人体免疫力[5]、增加人体吸收钙和铁的速度[6]、消炎[7]和修复关节[8]等。 工程纳米材料的毒理学是一个较新的发展领域。1990年美国召开了第一届纳米科技大会，这次会议标志着纳米科学的正式诞生。从此纳米技术飞速发展，被应用于很多的领域，可以说它已经融入我们的日常生活，成为不可或缺的一部分，涉及化妆品[9]、食品、药物输送系统[10]、治疗[11]和生物传感器[12]等诸多领域。但是关于其对环境和健康的影响的担忧仍然没有得到解决，它们在体内分布的情况和生物活性也鲜为人知。纳米材料的安全性还有待实验来证明[13]。据报道，相同浓度情况下，特细微粒运送过程中造成的危害比大颗粒更大[14]。首先，纳米粒子粒径极小，能轻易地通过皮肤、呼吸道、消化道等进入人体，还能穿透细胞膜。一般认为，同一物质的纳米级粒子和微米级粒子相比，前者引发炎症和肿瘤的可能性更大。其次，纳米材料具有极高的