推拿干预对便秘模型大鼠ckit蛋白表达的影响药学.docVIP

推拿干预对便秘模型大鼠ckit蛋白表达的影响药学 目录 TOC \o 1-9 \h \z \u 目录 1 正文 1 文1：推拿干预对便秘模型大鼠ckit蛋白表达的影响药学 1 1 材料与仪器 2 2 方法 3 一抗孵育将一抗按1∶500稀释，与膜一起孵育4℃过夜。 4 3 结果 5 4 讨论 6 文2：聪灵胶囊对血管性痴呆模型大鼠脑组织乙酰胆碱酯酶的影响药学 7 1 材料与仪器 8 2 方法 9 3 结果 10 4 讨论 10 参考文摘引言： 11 原创性声明（模板） 12 文章致谢（模板） 12 正文 推拿干预对便秘模型大鼠ckit蛋白表达的影响药学 文1：推拿干预对便秘模型大鼠ckit蛋白表达的影响药学 Abstract：ObjectiveTo approach the relativity of cotipation with the decrease of leg activity, and the effect of manipulation on the expression of c-kit protein in rats colon with cotipation. MethodsModels of cotipation were made by cutting both femur of rat. After manipulation was done, expression of c-kit protein was detected by western-blotting. ResultsThe expression of c-kit protein of rats colon was obviously reduced on model group (P＜) . The expression of c-kit protein of rats colon was obviously increased after treating of manipulation (P＜). ConclusionThe expression of c-kit protein of rats colon was obviously reduced by decreasing the activity of hind limb. The expression of c-kit protein of rats colon was obviously increased after treating of manipulation. We can deduce that the changes of numbe of ICC are related to the manipulation in treating cotipation. Key words：Cotipation； C-kit； Western blotting; Manipulation 长期卧床患者常便秘，骨折的卧床患者也便秘，根据上述观察建立大鼠便秘模型。推拿是治疗便秘的有效方法，但治疗机制研究报道较少。Cajal细胞在胃肠运动中的重要作用已被证实，Cajal细胞的数目和功能的改变将引起胃肠蠕动的异常，c-kit是卡哈耳氏细胞的标记物，运用免疫印迹方法检测大鼠结肠远端c-kit蛋白的表达，来揭示Cajal细胞数目的改变，从而阐明推拿治疗便秘的机制。 1 材料与仪器 研究对象 上海斯莱克实验动物有限公司提供10周龄、18周龄雄性SD大鼠各32只，随机分成8组即高龄（18周）正常对照组8只、高龄模型对照组8只、乳果糖治疗组8只、推拿干预组8只；低龄（10周）正常对照组10只、低龄模型对照组8只、乳果糖治疗组8只、推拿干预组8只。除正常对照组外，其他各组均剪除双后肢股骨 cm, 单笼饲养8周后，开始治疗，2个月检测各项指标。 仪器与试剂 仪器高速离心机、分光光度仪、垂直板电泳转移装置、恒温水浴摇床、多用脱色摇床。 试剂单去污剂裂解液、10％分离胶、4％浓缩校、G250考马斯亮蓝溶液、10X丽春红染液、封闭液、显影液、定影液、c-kit（sc-168）兔多抗购于santa cruz公司。 2 方法 造模方法具体操作如下：SD-大鼠用20％乌拉坦，按 ml／100 g体重给药，腹腔注射麻醉后，仰卧固定于木板上，75％酒精消毒下肢内侧及腹部皮毛，从膝关节向上剪除大腿内侧1 cm×2 cm大小被毛，再用安尔碘消毒局部皮肤，从膝关节向上剪开2 cm皮肤，用11号刀片挑开鼠膝关节，先向下分离股骨下端附着的韧带肌腱，将股骨远端从膝关节中分离出来，此处操作应小心，否则会引起血管损伤而出血，提起